產(chǎn)PVA降解酶混合菌系的篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化及酶學(xué)特性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、聚乙烯醇(PVA)是一種人工合成的水溶性高分子聚合物。因其具有pH穩(wěn)定、混溶性及乳化能力強(qiáng)等優(yōu)良特性,同時(shí)對(duì)天然纖維和一般的合成纖維具有較好的粘附性、成膜性和耐磨性,是目前滌棉織物經(jīng)紗上漿中的主要漿料。采用PVA上漿的織物,必須經(jīng)過(guò)退漿處理才能增加其吸水性。傳統(tǒng)的退漿方法是使用70~90℃的熱水對(duì)棉織物進(jìn)行洗脫,洗脫下的PVA隨廢水排出。由于PVA化學(xué)耗氧量大,可生化性較差,給水體造成了嚴(yán)重的污染。而利用酶法退漿,在退漿的同時(shí)對(duì)高聚合度

2、的PVA進(jìn)行降解,提高了退漿廢水的生物可降解性,從退漿過(guò)程中的水耗、能耗及對(duì)廢水的處理費(fèi)用看,酶法處理較常規(guī)方法有較大的優(yōu)勢(shì);同時(shí)酶法退漿條件溫和,對(duì)棉織物的損傷小,因此對(duì)PVA降解酶的研究越來(lái)越受到重視。本論文研究了一個(gè)能夠降解PVA的混合菌系的篩選、該菌系的產(chǎn)酶特性、搖瓶發(fā)酵的營(yíng)養(yǎng)條件和PVA降解酶的性質(zhì),對(duì)酶進(jìn)行了初步分離純化,并應(yīng)用PVA降解酶進(jìn)行退漿的小試研究。主要研究結(jié)果如下: (1)于宜興軍達(dá)紡織廠退漿車(chē)間的下水管

3、道的污泥中分離出一個(gè)能完全降解1g/LPVA205的混合菌系。該混合菌系完全降解1g/LPVA205所需的時(shí)間大約為2d,所產(chǎn)的PVA降解酶胞內(nèi)外都有分布,大約比例為47%比53%。 (2)通過(guò)平板稀釋涂布從該混合菌系中分離出三株可以利用PVA的菌株,兩株細(xì)菌和一株霉菌,其中一株細(xì)菌和霉菌能產(chǎn)生胞外PVA降解酶,但它們產(chǎn)生的胞外酶只能部分降解PVA,把三種菌兩兩混合培養(yǎng)或三者混合培養(yǎng)并不能徹底降解培養(yǎng)基中的PVA。并對(duì)這三株單菌

4、在PVA205培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落形態(tài)和細(xì)胞電鏡照片進(jìn)行研究。 (3)對(duì)混合菌系的發(fā)酵搖瓶培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化,適宜的發(fā)酵培養(yǎng)基組成為(g/L):PVA4,酵母粉3,NaNO32,K2HPO41.6,KH2PO40.2,MgSO4·7H2O0.4,CaCl20.05,F(xiàn)eSO4·7H2O0.02,NaCl0.02;pH7.2。 (4)采用了硫酸銨分級(jí)沉淀及DEAE纖維素陰離子交換柱對(duì)混合菌產(chǎn)生的PVA降解酶進(jìn)行了分離。發(fā)現(xiàn)PVA

5、降解酶主要集中在硫酸銨飽和度為30%-40%之間,用離子交換柱分離時(shí),出現(xiàn)兩個(gè)峰,第一個(gè)峰沒(méi)有酶活,第二個(gè)峰的比酶活與最初發(fā)酵上清液相比提高了7倍左右。 (5)混合菌系所產(chǎn)的PVA降解酶作用的適宜pH范圍為6.0~8.0,適宜溫度范圍為30~40℃;最適pH為7.0,最適溫度為35℃。 (6)對(duì)酶法退漿工藝研究中發(fā)現(xiàn),酶法退漿必需滿(mǎn)足以下幾個(gè)條件:1.合適的溫度,2.足夠的酶液,3.足夠的氧氣,4.PVA處于溶脹狀態(tài)。此

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