纖維素酶產(chǎn)生菌的篩選及產(chǎn)酶條件優(yōu)化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、纖維素酶在造紙、紡織、生物能源、食品加工、飼料等行業(yè)都有廣泛應(yīng)用。纖維素酶產(chǎn)生菌是生產(chǎn)纖維素酶產(chǎn)品的最有效方式之一。但是現(xiàn)有的產(chǎn)酶菌株雖然能夠為生產(chǎn)提供充足的纖維素酶資源,卻也存在著種種問題。如里氏木霉生產(chǎn)的β-葡萄糖苷酶活性較低就是缺點之一?,F(xiàn)今工業(yè)產(chǎn)酶工藝受限、酶活力不穩(wěn)定及成本過高,都成為纖維素酶應(yīng)用的限制性因素。我國對纖維素酶的需求量之大,使得尋找更高效的產(chǎn)纖維素酶菌株具有重要意義。
  本研究從大連周邊不同地區(qū)20余份土

2、樣中篩選出了一株具有明確降解纖維素特性的菌株JG,對其18SrDNA序列進行親緣關(guān)系分析后,確定該菌株為草酸青霉菌屬(Penicillium oxalicum)。
  對Penicillium oxalicum JG的產(chǎn)酶基本特性進行了研究。確定菌株在第7d達到最大產(chǎn)酶活性,最適初始發(fā)酵pH為2左右,具有一定的耐酸性。采用單因素法對菌株的發(fā)酵培養(yǎng)基進行優(yōu)化,確定菌株最適培養(yǎng)基組分為:麩皮為碳源,豆粉作為氮源,且添加一定濃度的K+具

3、有促進作用。
  采用響應(yīng)面優(yōu)化法(RSM),以濾紙酶活(FPA)作為響應(yīng)值,對菌株JG搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源、氮源和pH進行3因素3水平的優(yōu)化。得到最終優(yōu)化后培養(yǎng)基組分是:麩皮46.9 g/L,豆粉6.33 g/L,pH為1.5。實驗證明,利用優(yōu)化后的培養(yǎng)基得到FPA活性為0.366 IU/mL。
  以麩皮為底物,研究不同種類的表面活性劑對菌株JG的產(chǎn)酶影響。結(jié)果表明卵磷脂對菌株的產(chǎn)酶具有很大促進作用。并且在酸性條件下使用

4、卵磷脂對麩皮進行預(yù)處理,還原糖的產(chǎn)量可以大大提高。證明了卵磷脂可以作為草酸青霉菌JG的最適表面活性添加劑。
  5L發(fā)酵罐液態(tài)發(fā)酵驗證菌株的產(chǎn)酶能力。結(jié)果證明,菌株在發(fā)酵罐中的產(chǎn)酶時間由7天縮短至3天,與使用搖瓶發(fā)酵相比,四種CBH、FPA、CMCase、BGL酶活分別提高了12%、37.3%、55.6%和20.3%,以未添加卵磷脂為對照的發(fā)酵條件下四種酶活分別提高33.5%、63%、8.3%和38.9%。SDS-PAGE電泳檢測

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