尖孢鐮刀菌高產(chǎn)纖維素酶菌株的篩選鑒定及發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文對實驗室保藏的121株尖孢鐮刀菌(形態(tài)學(xué)鑒定)進行了產(chǎn)纖維素酶的研究,通過初篩復(fù)篩得到了了5株纖維素酶的高產(chǎn)菌株。對所得菌株進行了ITS序列鑒定和粗酶液酶學(xué)性質(zhì)分析,并進行了發(fā)酵產(chǎn)酶條件的優(yōu)化。
　　 通過剛果紅染色觀察水解圈的方法從121株尖孢鐮刀菌(形態(tài)學(xué)鑒定)中初步篩選出20株酶活較高的菌株。從初篩得到的20株菌種通過粗酶液酶活測定和酶活力計算,篩選出纖維素酶活力最高的5株菌,其中H57-1酶活力達到16.41U／ml

2、。
　　 對篩選出的5株菌進行ITSrDNA序列測定。測序結(jié)果利用www.NCBI.nlm.nih.gov中BALST軟件,與Genbank數(shù)據(jù)庫進行序列比對分析,結(jié)果顯示5株菌均與尖孢鐮刀菌(Fusarium Oxysporum Schlech)親緣關(guān)系最近,相似性達99％。
　　 對菌株H57-1的粗酶液酶學(xué)性質(zhì)進行了分析。以CMC-Na為底物,其最適反應(yīng)條件為PH=5.3,62℃。該酶具有良好的pH穩(wěn)定性和溫度穩(wěn)定

3、性,尤其作為真菌對強堿環(huán)境的耐受能力,一定程度上能彌補真菌纖維素酶耐堿性差和細菌纖維素酶酶活低的不足。
　　 對菌株57—1最適產(chǎn)酶發(fā)酵條件進行了優(yōu)化。以麩皮48.0g／L、蛋白胨14.0g／L、磷酸二氫鈉2.0g／L、氯化銨3.9g／L、氯化鈉2.0g／L、pH7.0配制發(fā)酵培養(yǎng)基,取3mL種齡48h的種子液接種發(fā)酵培養(yǎng)基,溫度28℃、搖床轉(zhuǎn)速150r／min振蕩培養(yǎng)85h,最終酶活力達到23.19U／ml,比初始酶活力提高了

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