1、從江西傳統(tǒng)發(fā)酵食品中分離目標(biāo)菌株(實驗室已有研究)，利用稀釋涂平板和顯微單孢子分離相結(jié)合方法分離出大量單孢子，再對單孢子進(jìn)行培養(yǎng)得到數(shù)株發(fā)育成熟的單孢子菌株，通過篩選得到產(chǎn)酶活力最高的菌株NC-1-6，采用形態(tài)鑒定和分子生物學(xué)鑒定相結(jié)合的方法鑒定該菌株為粗壯脈紋孢菌。 研究了菌株NC-1-6以稻草為唯一碳源時，稻草濃度、發(fā)酵溫度及培養(yǎng)基初始pH值對整個生長周期內(nèi)菌體生長和發(fā)酵產(chǎn)酶的影響。研究發(fā)現(xiàn)：稻草降解率與菌體生長狀況呈正相關(guān)

2、，2％濃度時，菌體生長最佳，稻草降解率也最高。菌體生長與產(chǎn)酶的最佳稻草濃度、最適pH值及最適溫度均不一致。菌體生長的最佳稻草濃度為2％，產(chǎn)酶最佳稻草濃度為5％；菌體生長最適初始pH值為5.5，產(chǎn)酶最適初始pH值為4.8；菌體生長最適溫度是先用25℃培養(yǎng)3 d再用30℃，產(chǎn)酶最適溫度是固定30℃。 為了進(jìn)一步提高產(chǎn)酶能力，以粗壯脈紋孢菌的野生株為出發(fā)菌株，通過紫外線和硫酸二乙酯的處理得到突變株60D7253。分別研究了各誘變劑量

3、與致死率和正變率的關(guān)系。菌株的篩選分為初篩和復(fù)篩：初篩是測定透明圈直徑與菌落直徑的比值(HC值)，復(fù)篩測定發(fā)酵液的濾紙酶活(FP酶活力)和內(nèi)切酶酶活(Cx酶活力)。突變株60D7253酶活力比出發(fā)株有較大提高，提高幅度分別為：FPA提高179.25％、Cx酶活力提高175.99％、C1酶活力提高147.2％、βG酶活力提高3.83％。 本文還對突變株60D7253發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。優(yōu)化后的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件為：選