大鼠高血壓相關性長鏈非編碼RNA的篩選及其在高血壓發(fā)病中的角色分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:高血壓是已有10億人受影響的全球性的疾病。長鏈非編碼RNA(longnon-coding RNA,lncRNA)已被發(fā)現和多種生物途徑和疾病相關,是近年來的研究熱點,但在高血壓領域的報道是較為缺乏的。
  目的:探尋在大鼠的高血壓發(fā)病中長鏈非編碼RNA的可能地位。
  方法:取5對自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)和Wistar Kyoto(WKY)大鼠同側腎臟皮質,Trizol法提取總RNA后純化,合成cDNA,熒光標記并片

2、段化后區(qū)其中3對標本與Agilent大鼠4*60k lncRNA芯片雜交,掃描后檢測表達量;將共表達的mRNA進行基因本體功能分析,預測lncRNA可能參與的生物學途徑;選取其中6對表達差異較大的序列,采用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)驗證其表達差異;采用核質分離方法定位序列在細胞內的位置;選取其中一條差異較大的lncRNA,合成序列的siRNA,在細胞水平干擾其表達。
  結果:芯片共篩選出145條lncRNA和383條m

3、RNA存在差異表達,GO(Geneontological)和KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路預測顯示這些差異表達的lncRNA和多種分子生物學途徑相關;實時熒光定量PCR結果指出存在表達差異(P<0.05),并且差異傾向和芯片符合。在細胞水平利用SiRNA干擾lncRNA使之表達下調,但干擾效率一般。
  結論:長鏈非編碼RNA的改變可能在高血壓的病理生理學途徑中扮演一

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