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![胃黏膜癌變過程中胃泌素表達(dá)變化及其生物學(xué)機(jī)制.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/a8a507ae-b1fe-4220-b312-f186cdd64e86/a8a507ae-b1fe-4220-b312-f186cdd64e861.gif)
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文檔簡介
1、目的:胃泌素(Gastrin,Gas)是由胃竇黏膜和十二指腸G細(xì)胞分泌的多肽類激素,主要生物學(xué)功能是刺激胃酸分泌及營養(yǎng)胃腸道黏膜。近年來多項研究表明胃泌素及其衍生物有促進(jìn)細(xì)胞增殖和抑制細(xì)胞凋亡的作用,其作用機(jī)制仍尚未完全明確。本研究的目的是進(jìn)一步明確胃泌素在胃癌發(fā)生發(fā)展過程中的表達(dá)變化及其生物學(xué)機(jī)制。
方法:利用免疫組化方法檢測未酰胺化胃泌素(G-18)與酰胺化胃泌素(G-17)分別在非萎縮性胃炎、腸上皮化生型胃黏膜、異型增生
2、胃黏膜以及胃癌中的表達(dá)變化;應(yīng)用MTT方法檢測不同濃度大蒜素、小檗堿和奧曲肽在不同時間對胃癌BGC823細(xì)胞的生長抑制作用;流式細(xì)胞技術(shù)檢測大蒜素、小檗堿和奧曲肽對胃癌BGC823細(xì)胞周期及凋亡情況的影響;利用RT-PCR、Real Time PCR和Western blot等方法明確大蒜素、小檗堿和奧曲肽作用于胃癌BGC823細(xì)胞后胃泌素基因及蛋白水平的表達(dá)變化。
結(jié)果:G-18在非萎縮性胃炎和胃癌中的陽性表達(dá)率分別為57%
3、(21/37)和63%(19/30),G-18在胃癌中的表達(dá)高于非萎縮性胃炎(P<0.05);G-17在非萎縮性胃炎和胃癌中的陽性表達(dá)率分別是23%(9/37)和43%(13/30),G-17在胃癌中的表達(dá)高于非萎縮性胃炎(P<0.05)。G-18與G-17比較,在非萎縮性胃炎、腸上皮化生、異型增生、胃癌各組中的表達(dá)趨勢一致,均有逐漸上調(diào)的趨勢,且以G-17表達(dá)上升趨勢更為明顯;不同濃度的大蒜素、小檗堿和奧曲肽對胃癌BGC823細(xì)胞生長
4、均有抑制作用,抑制作用的強(qiáng)度呈濃度依賴性;10ug/ml大蒜素作用于胃癌BGC823細(xì)胞24小時后其細(xì)胞抑制率為51%,流式細(xì)胞技術(shù)檢測結(jié)果顯示大蒜素有促進(jìn)細(xì)胞凋亡作用,并使細(xì)胞阻滯于G2/M期。50uM小檗堿作用于胃癌BGC823細(xì)胞24小時后其細(xì)胞抑制率為42%,流式細(xì)胞技術(shù)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)小檗堿促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用較弱,主要使細(xì)胞阻滯于G0/G1期。10ug/ml奧曲肽作用于胃癌BGC823細(xì)胞24小時后其細(xì)胞抑制率為22%,流式細(xì)胞技
5、術(shù)檢測結(jié)果顯示奧曲肽有明顯的促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用;RT-PCR和Real-time PCR結(jié)果顯示大蒜素作用于胃癌BGC823細(xì)胞后胃泌素的表達(dá)與對照組相比略降低,小檗堿作用于胃癌BGC823細(xì)胞后胃泌素的表達(dá)明顯降低,奧曲肽作用于胃癌BGC823細(xì)胞后胃泌素的表達(dá)變化不明顯;Western blot結(jié)果提示大蒜素、小檗堿和奧曲肽作用于胃癌BGC823細(xì)胞后胃泌素蛋白水平表達(dá)與基因水平一致。
結(jié)論:在胃黏膜病變演化過程中G-18
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