1、目的:通過(guò)檢測(cè)沙眼衣原體(D血清型)感染的Hela229細(xì)胞中Bim蛋白質(zhì)的表達(dá)水平及凋亡誘導(dǎo)劑作用后的凋亡情況，探討沙眼衣原體感染對(duì)宿主細(xì)胞凋亡的影響及可能機(jī)制，從而為研究沙眼衣原體持續(xù)感染機(jī)制、防治沙眼衣原體相關(guān)疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)及新的思路。 方法:1.Bim蛋白質(zhì)表達(dá)的檢測(cè)：采用Western-blot分別檢測(cè)沙眼衣原體感染和未感染的Hela229細(xì)胞Bim蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。2.細(xì)胞凋亡的檢測(cè)：凋亡誘導(dǎo)劑etoposide作

2、用Hela229細(xì)胞后，經(jīng)Hoechst33258染色用熒光顯微鏡觀察核濃縮和凋亡小體；瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA Ladder帶；流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡率。 結(jié)果:1.Western-blot結(jié)果顯示Hela229細(xì)胞在未感染及感染沙眼衣原體6小時(shí)后可檢測(cè)到Bim的表達(dá)，且兩組細(xì)胞間Bim表達(dá)無(wú)明顯差異。在沙眼衣原體感染24小時(shí)、48小時(shí)后均未檢測(cè)到Bim的表達(dá)。2.經(jīng)etoposide作用6小時(shí)后，未感染沙眼衣原體的Hela22

3、9細(xì)胞用熒光顯微鏡觀察到明顯的核濃縮和凋亡小體；瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)到DNA Ladder帶；流式細(xì)胞儀檢測(cè)的凋亡率為90.64％，與未經(jīng)誘導(dǎo)劑作用的Hela229細(xì)胞比較有差異(P<0.05)。而沙眼衣原體感染24小時(shí)的Hela229細(xì)胞，經(jīng)凋亡誘導(dǎo)劑作用6小時(shí)后未觀察到核濃縮和凋亡小體以及DNA Ladder帶；流式細(xì)胞儀檢測(cè)的凋亡率為11.50％，與未感染沙眼衣原體的Hela229細(xì)胞誘導(dǎo)后的凋亡率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；