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文檔簡介
1、目的:
利用基因轉(zhuǎn)染技術(shù),建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,HER-2/neu基因高表達的Ishikawa細胞株,檢測轉(zhuǎn)染前后細胞株HER-2/neu、COX-2、P450arom蛋白的表達變化以及轉(zhuǎn)染前后E2表達的變化,探討HER-2/neu介導的COX-2/PGE2/P450arom信號通路在子宮內(nèi)膜癌雌激素依賴中的作用機制。
方法
1、應用細胞培養(yǎng)技術(shù)對子宮內(nèi)膜腺癌Ishikawa細胞株進行培養(yǎng);
2、 2、利用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,HER-2/neu基因高表達的子宮內(nèi)膜癌Ishikawa細胞株;
3、Western-bloting方法檢測轉(zhuǎn)染前后細胞COX-2、P450arom蛋白的表達水平;
4、ELISA方法檢測轉(zhuǎn)染前后細胞培養(yǎng)上清液中E2的含量;
5、用SPSS統(tǒng)計軟件對結(jié)果進行統(tǒng)計分析,并結(jié)合實驗結(jié)果分析HER-2/neu對COX-2/PGE2/P450arom信號通路的調(diào)控作
3、用,以探討HER-2/neu在雌激素依賴性子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
結(jié)果
1、建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HER-2/neu基因的人子宮內(nèi)膜腺癌Ishikawa細胞,轉(zhuǎn)染后HER-2/neu基因的表達增加(P<0.05);
2、HER-2/neu基因表達增加(P<0.05)的同時COX-2、P450arom蛋白表達亦增加(P<0.05);
3、HER-2/neu、COX-2、P450arom表
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