1、苦豆子類生物堿是從藥用植物苦豆子中提取分離純化的一類生物堿，包括苦參堿、氧化苦參堿、槐定堿、槐果堿、槐胺堿、萊曼堿等共二十余種，他們均屬于喹諾里西啶生物堿（Quinolizidine），化學結構相似?？喽棺宇惿飰A藥理作用廣泛，如解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、平喘、抗腫瘤以及抗心律失常等。在中樞作用方面，苦參堿和槐定堿分別是這類生物堿中具有抑制作用和興奮作用的代表，有文獻報道苦參堿具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛以及降低體溫等作用，而槐定堿則可興奮中樞并誘發(fā)癲癇樣反

2、應。本實驗以苦參堿和槐定堿為研究對象，采用神經電生理學方法觀察了這兩種藥物對中樞神經突觸可塑性的影響，并對槐定堿致癲癇樣作用進行研究。 第一部分：苦參堿和槐定堿對神經可塑性的影響 目的：以苦參堿（matrine）和槐定堿（sophoridine）為研究對象，采用神經電生理學方法觀察了這兩種藥物對中樞神經突觸可塑性的影響。 方法：采用急性埋藏電極記錄麻醉大鼠海馬齒狀回誘發(fā)電位的方法，以群峰電位峰值幅度（PS amp

3、litude）和群體興奮性突觸后電位始段上升斜率（pEPSP slope）為觀察指標，觀察苦參堿和槐定堿對內側穿行通路（MPP）－海馬齒狀回（DG）顆粒細胞這一神經通路聯(lián)系上基礎突觸活動、LTP誘導以及雙脈沖刺激反應的影響?？鄥A和槐定堿以腹腔注射（I.p.）形式給藥，劑量分別為：苦參堿7.8、15.6、31.2mg/kg，槐定堿3、6、12mg/kg。引發(fā)LTP的條件刺激為60Hz、60個脈沖的高頻刺激，雙脈沖刺激實驗按刺激間隔（IP

4、Is）20～1000ms 分別給出。 結果：（1）苦參堿能夠顯著抑制基礎誘發(fā)電位中的PS 幅度和pEPSP slope；能夠顯著抑制條件刺激（60 pulses at 60Hz）引發(fā)的LTP的PS幅度，但對pEPSP slope沒有影響；納洛酮能夠翻轉苦參堿在LTP誘導中的抑制作用；苦參堿對雙脈沖刺激反應沒有影響。（2）槐定堿能夠明顯增強基礎誘發(fā)電位的PS幅度，但對pEPSP slope沒有影響；能夠促進條件刺激（60 puls

5、es at 60Hz）引發(fā)的pEPSP slope LTP現(xiàn)象，但對PS幅度沒有影響；槐定堿對雙脈沖刺激反應有明顯的抑制作用。 結論：（1）苦參堿對麻醉大鼠海馬DG顆粒細胞的興奮性和MPP-DG通路形成的突觸聯(lián)系過程均有抑制作用；對高頻條件刺激誘發(fā)LTP后突觸后顆粒細胞的興奮性仍有抑制作用，但對條件刺激后突觸的傳遞效能沒有影響；納洛酮能夠翻轉苦參堿在LTP誘導中對PS幅度LTP的抑制作用，提示苦參堿的抑制作用可能與激動中樞阿片受

6、體有關；苦參堿對長時程突觸可塑性的影響機制可能與短時程突觸可塑性中的細胞和突觸機制無關。（2）槐定堿對基礎突觸傳遞過程中海馬DG顆粒細胞的興奮性有促進作用，但對MPP-DG通路形成的突觸聯(lián)系過程沒有影響；對高頻刺激誘發(fā)LTP后突觸后顆粒細胞的興奮性沒有影響，但對高頻刺激誘發(fā)LTP后的突觸傳遞過程有促進作用；槐定堿可能通過提高細胞外鈣離子濃度和突觸前遞質釋放幾率而發(fā)揮其在雙脈沖刺激反應中的抑制作用。 第二部分：槐定堿致癲癇樣作用研

7、究 目的：觀察槐定堿（sophoridine）致癇大鼠清醒核團腦電（IEEG)變化特點；研究癇樣特征分類，并利用工具藥研究致癇作用機制。 方法：采用慢性埋藏電極記錄清醒大鼠核團腦電（intracranial electroencephalography，IEEG）的方法，觀察槐定堿對大鼠產生癇樣放電的特點，并判斷致癇原發(fā)部位；采用小鼠模型實施工具藥拮抗實驗，探討槐定堿所致癲癇樣發(fā)作的作用機制。 結果：海馬齒狀回（

8、DG）內顆粒細胞對于槐定堿致癇作用最敏感，其次是內側穿行通路（MPP）和顳葉皮層（TC）。閾下催眠劑量的地西泮、催眠劑量的巴比妥鈉可以對抗槐定堿引起的癇樣驚厥的發(fā)生；對抗最大電休克劑量的苯妥英鈉不能對抗槐定堿引起的癇樣驚厥的發(fā)生，但可以延緩驚厥的發(fā)生時間和小鼠的死亡時間。 結論：海馬內部異常放電在槐定堿致癇作用中可能起到重要作用，海馬部位可能是癇樣發(fā)作的原發(fā)部位；槐定堿的致動物癲癇樣發(fā)作屬于臨床小發(fā)作類型，地西泮是較理想的預防藥