1、NF-κB在免疫，炎癥和脅迫應激反應中起著關鍵作用。NF-κB與癌癥，自身免疫性疾病和神經(jīng)退行性疾病有著密切的關系。NF-κB能夠被促炎癥因子、流感病毒和紫外線等很多生物、物理及化學性的因子激活。在白介素1介導的NF-κB信號通路激活的過程中，TRAF6與E2(Ubc13/Uev1A)共同催化合成K63連接的自由多泛素鏈，然后自由多泛素鏈再激活下游蛋白激酶TAK1。在激活TAK1的過程中，怎樣形式的自由多泛素鏈介導了蛋白激酶的激活，TR

2、AF6是怎樣在短時間內高效地合成大量的自由多泛素鏈作為傳遞信號分子，這些重要的問題需要進一步的解答。通過建立體外的泛素化合成系統(tǒng)，我們分離純化了不同長度的K63自由多泛素鏈。通過體外TAK1激酶激活實驗，我們發(fā)現(xiàn)只有長的多泛素鏈才能介導TAK1激酶的激活。這從另一方面也說明了TRAF6是一個高效的、具有持續(xù)合成能力的泛素連接酶。通過對TRAF6不同結構域截短體的分析，我們鑒定到Coiled-coil(CC)結構域對TRAF6持續(xù)高效地合

3、成泛素鏈至關重要。CC結構域介導了TRAF6的自身寡聚化，形成了巨大的寡聚復合物。大量的TRAF6相互靠近，可以使TRAF6在接受上游信號的時候，行使功能的鋅指結構域一次就可以結合大量的Ubc13/Ub～Ubc13，因而在短時間內合成長的自由多泛素鏈。突變CC結構域破壞TRAF6的寡聚化狀態(tài)，TARF6的酶活就大大降低。我們把CC結構域融合到另外一個不能激活NF-κB的泛素連接酶CHIP上，發(fā)現(xiàn)CHIP具有了激活NF-κB的能力，說明了

4、CC結構域的功能是可以轉移的。緊接著，我們發(fā)現(xiàn)CC結構域自身在介導TRAF6寡聚化的同時也可以結合Ubc13/Ub～Ubc13，在TRAF6合成泛素鏈的過程中提供大量的Ub～Ubc13，保證長多泛素鏈的高效持續(xù)合成。我們找到了影響與E2相互作用的CC結構域的突變體，它的酶活大大降低，在細胞內和體外都不能合成長多泛素鏈激活NF-κB信號通路。綜上所述，我們闡明了TRAF6合成自由多泛素鏈的具體生化機制，提出了TRAF6工作的全新模型：CC