1、心律失常是臨床上常見(jiàn)且又對(duì)患者的生活質(zhì)量和生命安全影響極大的心血管疾病。從90年代CAST和CASTII試驗(yàn)結(jié)果公布以來(lái)，人們開(kāi)始重視抗心律失常藥物治療的收益與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。參松養(yǎng)心膠囊(SSYX)是一種復(fù)方制劑，方中多數(shù)藥物均有較好的抗心律失常作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，SSYX可以明顯抑制藥物誘發(fā)的心律失常；隨機(jī)臨床驗(yàn)顯示，SSYX對(duì)治療冠心病心律失常有明顯療效。關(guān)于SSYX抗心律失常的機(jī)制和對(duì)心肌細(xì)胞離子通道的影響至今未見(jiàn)報(bào)道。 目的

2、：觀察SSYX干粉提取溶液對(duì)單個(gè)心室肌細(xì)胞L型鈣電流(I<,Ca,L>)，鈉電流(I<,Na>)，瞬時(shí)外向鉀電流(I<,to>)，內(nèi)向整流鉀電流(I<,K1>)，延遲整流鉀電流慢成分(I<,Ks>)的影響，以及對(duì)在HEK293細(xì)胞表達(dá)hERG通道電流(I<,Kr>)的影響。探討SSYX在離子通道水平的抗心律失常作用機(jī)制。 方法：急性分離豚鼠和大鼠心臟，用Langendoff灌流系統(tǒng)離體灌流，聯(lián)合使用膠原酶Ⅱ和蛋白酶E，分離獲得單

3、個(gè)的心室肌細(xì)胞。培養(yǎng)HEK293細(xì)胞，用脂質(zhì)體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-hERG和pEGFP-C1質(zhì)粒，于轉(zhuǎn)染后24～48h在熒光顯微鏡下，對(duì)有綠色熒光表達(dá)的細(xì)胞進(jìn)行電生理記錄。用標(biāo)準(zhǔn)的全細(xì)胞膜片鉗記錄技術(shù)，記錄豚鼠心室肌細(xì)胞的I<,Ca,L>，I<,Na>，I<,K>電流，大鼠心室肌細(xì)胞的I<,to>和I<,K1>電流，以及轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性HEK293細(xì)胞的I<,Kr>電流。觀察SSYX干粉提取溶液對(duì)各種離子通道電流的影響。 結(jié)果：

4、通過(guò)酶解法得到的豚鼠和大鼠心室肌細(xì)胞能夠記錄到動(dòng)作電位和各種離子通道電流，表明其具有良好的細(xì)胞電生理特性。大約40％～60％瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后HEK293細(xì)胞表達(dá)綠色熒光蛋白，同時(shí)可記錄到I<,Kr>通道電流，表明細(xì)胞模型構(gòu)建成功。文中介紹了SSYX對(duì)動(dòng)作電位的影響、SSYX對(duì)I<,Ca,L>通道的影響、SSYX對(duì)I<,Na>通道的影響、SSYX對(duì)I<,to>通道的影響、SSYX對(duì)I<,K1>通道的影響、SSYX對(duì)I<,Ks>通道的影響，以及S

5、SYX對(duì)I<,Kr>通道的影響。 結(jié)論：參松養(yǎng)心膠囊干粉提取溶液對(duì)I<,Ca>,L、I<,Na>、I<,to>、I<,Ks>和I<,K1>多種心室肌離子通道均具有不同程度的阻滯作用。SSYX可以抑制豚鼠心室肌細(xì)胞I<,Ca>,L的峰值電流，使通道的時(shí)間依賴性激活和失活減慢，并促進(jìn)通道的電壓依賴性失活，使穩(wěn)態(tài)失活曲線的V<,1/2>左移。SSYx可以抑制豚鼠心室肌細(xì)胞I<,Na>的峰值電流，并使通道的穩(wěn)態(tài)激活曲線右移。SSYX可以

6、抑制大鼠心室肌細(xì)胞I<,to>峰值電流，加速通道時(shí)間依賴性失活，并促進(jìn)通道的電壓依賴性失活。SSYX可以抑制大鼠心室肌細(xì)胞I<,K1>的內(nèi)向成分。SSYX可以抑制豚鼠心室肌細(xì)胞I<,K>電流，主要是作用于其慢激活成分I<,Ks>。SSYX對(duì)hERG通道的電流幅度，通道失活速度及通道失活后恢復(fù)速度無(wú)顯著影響。 SSYX對(duì)這些通道的綜合作用可使得心肌細(xì)胞的除極幅度降低，動(dòng)作電位時(shí)程和有效不應(yīng)期延長(zhǎng)，這可能是其產(chǎn)生抗心律失常作用的機(jī)制。同時(shí)這