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![包埋玻璃化法超低溫保存條斑紫菜O3D自由絲狀體的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/89b6f0fa-46bd-4d64-b46a-38a4c6f9af60/89b6f0fa-46bd-4d64-b46a-38a4c6f9af601.gif)
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文檔簡介
1、本文采用包埋-玻璃化法超低溫保存條斑紫菜自由絲狀體。將1.5g/10mL(鮮重)材料包埋于含30﹪的NaCl的3﹪的褐藻酸鈣膠球中,在暗處恢復培養(yǎng)1d后用植物玻璃化溶液(plantvitrificationsolution,PVS)(5﹪(v/v)二甲基亞砜+30﹪(v/v)甘油+15﹪(v/v)乙二醇+0.4mol/L蔗糖溶液)在不同的條件下處理不同的時間。根據膠球內葉綠素的含量計算存活率。本文主要研究了PVS處理時間,裝載條件,處理
2、溫度等因素對存活率的影響,以及在脫水過程和冰凍前后丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量以及超氧化物歧化酶(superoxidedismutas,SOD)活性的變化。結果如下: 1PVS處理時間對存活率的影響將30個膠球放入100﹪的PVS溶液中在4℃下分別處理(min)0,2,5,10,20。結果發(fā)現,在PVS處理5min后凍存的材料存活率最高為28.1﹪。 2.裝載時間對條斑紫菜冰凍存活率的影響在用10
3、0﹪PVS脫水處理之前,用25﹪的PVS溶液對條斑紫菜絲狀體在4℃下進行裝載處理(min)0,2,5,10,20,結果顯示,最佳裝載時間為10min,經此過程冰凍后的材料的存活率由未經裝載的28.7﹪提高到了42.3﹪。 3處理條件對條斑紫菜冰凍后存活率的影響在0℃條件下處理,條斑紫菜自由絲狀體冰凍之后存活率從36.4﹪(25℃)增加到47.9﹪,提高了10個百分點。 4化凍條件對條斑紫菜冰凍存活率的影響研究發(fā)現:在40
4、℃的化凍溫度下,條斑紫菜絲狀體的存活率顯著高于0℃-20℃下的存活率,為41.9﹪。但是化凍溫度超過40℃以后,雖然進一步提高了化凍速率,但存活率卻有所下降。 5脫水和冰凍過程中MDA含量的變化冰凍后材料的MDA含量均高于未冰凍材料的MDA含量,同時經過裝載處理的材料冰凍后的MDA含量低于未經裝載的材料冰凍后的MDA含量,說明裝載過程可以減少冰凍過程中對膜的傷害。 6脫水和冰凍過程中SOD活性的變化冰凍后材料的SOD活性
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