1、研究背景：亞臨床動脈粥樣硬化(subclinical atherosclerosis)是動脈粥樣硬化(atherosclerosis AS)的早期階段，指患者無臨床癥狀，但彩色B超證實頸總動脈、股動脈或髂總動脈內(nèi)中膜厚度≥1.0mm和/或有動脈粥樣硬化斑塊出現(xiàn)。2型糖尿病(T2DM)多因素干預的主要目的之一是預防亞臨床AS的發(fā)生發(fā)展。B類清道夫受體(scavenger receptor class B,Scarb,SRB)是LDL-c、

2、HDL-c代謝中的重要受體蛋白，包括CD36和B類清道夫受體BI(scavenger receptorclass B type I，Scarbl，SRB1)兩種。CD36抗原是一種細胞膜糖蛋白，存在多種配體(如氧化的和乙?；腖DL-c等)，參與包括脂質(zhì)代謝和動脈粥樣硬化在內(nèi)的許多生理和病理過程。SRB1是CD36蛋白家族成員，與CD36共享30％的同源序列，為脂蛋白受體中唯一能真正介導細胞與HDL-c作用的膜受體。 研究目的：

3、對新診2型糖尿病進行4年的多因素干預，了解代謝控制狀況及亞臨床AS的發(fā)生情況；通過檢測CD36、SRB1基因多態(tài)性、外周血單核細胞表面CD36表達情況，分析它們與T2DM患者代謝水平及亞臨床AS進程的關系。 第一部分新診2型糖尿病亞臨床動脈粥樣硬化的前瞻性多因素干預 研究目的：探討不同方案干預下新診斷2型糖尿病(T2DM)患者的代謝指標控制及亞臨床動脈粥樣硬化(AS)發(fā)生和發(fā)展的情況。 方法：采用前瞻性開放研究，將

4、170例(35-70歲)病程1年以內(nèi)、無AS的新診T2DM患者按隨機數(shù)字表法分為四組，分別為：A組(強化降糖+降壓治療)、B組(強化降糖+降壓+調(diào)脂治療)、C組(在B組基礎上加服維生素E0.2g/天)及D組(在B組基礎上加服復方丹參滴丸30丸/天)。共觀察4年，每月隨訪一次，定期復查空腹血糖(FBS)、餐后2小時血糖(PBS)、糖化血紅蛋白(HbAlc)、血脂、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、體重指數(shù)(BMI)、腰臀比(WHR)和血

5、管彩超，了解干預4年的代謝控制情況及其頸總動脈(CCA)、股動脈(FIA)內(nèi)中膜厚度(IMT)和/或AS斑塊發(fā)生的進展。 結果：①170例患者中，實際完成4年多因素干預共149例，失訪21例(脫失率12.4％)。②干預4年結束時，149例患者HbAlc、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-c)、SBP、DBP水平均較基線顯著下降(p<0.01)；WHR、HbAlc、TG、TC、LDL-c、SBP、DBP達標

6、率分別為29.5％、54.4％、74.5％、71.1％、73.8％、98.0％和98.7％，較基線顯著提高(p<0.01)；⑧共有88例發(fā)生亞臨床AS，發(fā)生率達59.1％；A、B、C、D四組患者亞臨床AS發(fā)生率分別為69.4％、53.8％、62.2％、51.4％，各組間比較p>0.05；④A、B、C、D四組CCA-IMT、FA-IMT均較基線增加，各組與基線比較p均<0.01； B、C、D三組干預4年后低密度脂蛋白(LDL-c)、膽固醇

7、(TC)顯著低于A組(p分別為<0.01、<0.05)。 結論：多因素強化干預盡管可使T2DM患者代謝狀況得到很大改善，WHR、HbAlc、TG、TC、LDL-c、SBP、DBP達標率顯著提高，但不能完全阻止大血管病變的發(fā)生，隨著病程的增加，亞臨床AS呈進展趨勢。 第二部分清道夫受體B(CD36、及SRB1)基因多態(tài)性與2型糖尿病及其亞臨床動脈粥樣硬化進程的關系 目的：探討清道夫受體B基因(CD36及SRB1基因

8、)多態(tài)性與多因素干預下T2DM亞臨床AS發(fā)生的關系。 方法：采用PCR-RFLP方法檢測470例湖南地區(qū)漢族T2DM患者及220例無糖尿病對照組CD36(CD36-rsl984112、CD36-T620C位點)及SRB1-rs5888基因多態(tài)性，比較它們基因型及等位基因頻率的差異。采用logistic回歸模型分析CD36-1984112及SRB1-rs5888基因型及代謝指標對亞臨床AS的影響，預測多因素干預下發(fā)生亞臨床AS的影

9、響因素。 結果：①T2DM患者與健康受試者CD36(CD36-rsl984112位點、CD36-T620C位點)基因型及等位基因頻率比較均無顯著性差異(p>0.05)；SRB1基因型及等位基因頻率在T2DM與對照組間比較差異有顯著性(p<0.01)，T2DM患者攜帶SRB1-rs5888C/C基因型的頻率低于健康人群(46.6％VS 63.2％，p<0.01)，攜帶SRB1-C/T的頻率高于健康人群(43.4％vs 30.5％，

10、p<0.01)，T2DM患者攜帶等位基因T的頻率高于健康人群(31.7％VS 24.5％，p<0.01)；②將所有攜帶CD36-rsl9841 12A/A和/或SRBl-rs5888T/T的單倍體型1、2、3、6、9合并為一類(單倍體型A)，其他的單倍體型4、5、7、8合并為一類(單倍體型B)，兩者比較單倍體型A亞臨床AS的發(fā)病率較B為高(65.4％VS 52.1％，p=0.133)；③以亞臨床AS是否發(fā)生(0、1)為因變量做logis

11、tic回歸分析顯示，多因素干預下影響亞臨床AS發(fā)生的因素有3個：年齡(OR值1.103)、LDL-c(OR值2.552)、吸煙(OR值2.242)，CD36與SRB1基因型及其交互作用、其他代謝指標均未進入logistic回歸模型。 結論：①SRBl-rs5888基因型及等位基因頻率在T2DM患者與健康受試者中分布不同，T2DM患者攜帶SRB1等位基因T的頻率高于健康人群。②多因素干預下，除年齡外，LDL-c和吸煙是亞臨床AS發(fā)

12、生的主要危險因素，CD36及SRB1基因多態(tài)性可能與亞臨床AS進程無關。 第三部分 2型糖尿病單核細胞表面清道夫受體CD36的表達及其影響因素的分析 目的：了解2型糖尿病患者外周血單核細胞表面CD36的表達情況，探討影響CD36表達的有關因素及CD36表達與亞臨床AS的關系。 方法：采用PCR-RFLP方法檢測102例湖南地區(qū)漢族T2DM患者和8例健康受試者CD36-1984112及SRB1-rs5888基因多態(tài)

13、性，采用密度梯度離心法分離T2DM患者和健康受試者外周血單個核細胞，流式細胞儀檢測單核細胞表面CD36蛋白表達熒光強度，比較T2DM無AS組、T2DM亞臨床AS組及健康對照組CD36的表達。多元線性回歸分析CD36表達的影響因素。Logistic回歸分析多因素干預下亞臨床AS與CD36表達的關系。 結果：T2DM亞臨床AS組外周血單核細胞CD36的平均熒光強度(MFI)高于T2DM無AS組(1382.23±658.69 vs 1

14、173.02±339.71道數(shù)，p=0.047)。CD36高表達組SBP較低表達組為低，p=0.020，校正年齡后，p=0.010。多元線性回歸分析顯示，影響T2DM患者CD36表達的因素有：年齡(p=0.005)、性別(p=0.021)、SBP(p=0.027)，標化偏回歸系數(shù)分別為0.28、0.3 1、-0.21；男、女性T2DM患者分別做多元線性回歸分析，影響男性CD36表達的因素為年齡(p=0.002)；影響女性CD36表達的因

15、素為DBP(p=0.001)。以是否存在亞臨床AS(0、1)為因變量，以CD36單核細胞表面表達的熒光強度等指標作為自變量做logistic回歸，留在方程的因素是年齡(p=0.004)、LDL-c(p=0.095)，CD36-MFI未進入方程。 結論：①T2DM亞臨床AS組外周血單核細胞表面CD36表達較無AS組高。②年齡、性別、SBP是CD36表達的影響因素，增齡、男性、低的SBP可使CD36表達增加；影響男性CD36表達的主