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![芥子堿對(duì)小鼠肝癌H22的抑制作用及其機(jī)制初探.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/ed827d1e-32d0-4e86-b3f7-e23f6ecef645/ed827d1e-32d0-4e86-b3f7-e23f6ecef6451.gif)
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文檔簡介
1、原發(fā)性肝癌是惡性腫瘤之首,調(diào)查顯示我國每年死于肝癌的人數(shù)超過11萬,占世界肝癌死亡人數(shù)的45%。在臨床抗腫瘤藥物研究中,源于植物的生物堿一直都是抗腫瘤藥物的重要來源。近年來,生物堿類抗腫瘤作用及其抗腫瘤機(jī)制的研究已成為攻克腫瘤這一世紀(jì)難題的重要領(lǐng)域之一。但目前臨床上廣泛運(yùn)用的生物堿類藥物均存在毒副作用強(qiáng)、耐藥性高、選擇性差的缺點(diǎn),能否找到一種低毒、高效、選擇性好的抗腫瘤藥物已成為國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)。
本研究通過分離、純化
2、白芥子的主要藥效成分--芥子堿,研究其對(duì)小鼠肝癌H22的抑制作用及其機(jī)制,為芥子堿的開發(fā)應(yīng)用提供參考。
采用溶劑萃取法分離制備芥子堿,以乙醇與水多次交互重結(jié)晶,得到淺黃色針狀結(jié)晶芥子堿,得率為0.382%,并采用高效液相色譜法和分光光度法測定其純度達(dá)95%以上。
通過MTT法和細(xì)胞排染法檢測芥子堿對(duì)小鼠肝癌H22細(xì)胞體外增殖的影響,并通過DNA Ladder試驗(yàn)檢測是否發(fā)生凋亡。結(jié)果顯示:芥子堿對(duì)小鼠肝癌H2
3、2細(xì)胞增殖有顯著的體外抑制作用,且給藥組出現(xiàn)不同程度的凋亡特征現(xiàn)象。
昆明小鼠接種H22細(xì)胞,分別建立腹水型肝癌H22模型和小鼠肝癌H22實(shí)體瘤模型,觀察芥子堿對(duì)小鼠肝癌H22的體內(nèi)抑制作用,HE染色法觀察細(xì)胞形態(tài)。通過檢測胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)探究芥子堿對(duì)小鼠免疫器官的影響,并采用丫啶橙染色觀察細(xì)胞凋亡形態(tài),瓊脂糖凝膠電泳及免疫組織化學(xué)法研究芥子堿的誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:芥子堿對(duì)小鼠肝癌H22實(shí)體瘤有顯著的抑制作用
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