葡萄籽提取物對肝損傷保護作用的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:1)研究噴霧干燥方法對葡萄籽提取物(grape seed extracts,GSE)抗氧化活性的影響;2)研究GSE對CCl<,4>所致小鼠急性化學(xué)性肝損傷和卡介苗(BCG)聯(lián)合脂多糖(LPS)誘導(dǎo)小鼠免疫性肝損傷的保護作用。方法:1)篩選新疆某葡萄酒廠酒渣中的葡萄籽,用石油醚完全脫脂,乙醇回流提取,提取液減壓濃縮后,濃縮液分別采用噴霧干燥和自然干燥兩種方法干燥得浸膏粉。通過比較兩種干燥方法所得浸膏粉的抗氧化活性一包括還原能力,清

2、除DPPH自由基和羥自由基能力,研究不同干燥方法對葡萄籽提取物抗氧化活性的影響;2)CCl<,4>所致急性化學(xué)性肝損傷動物模型的復(fù)制及劑量分組:取雄性昆明種小鼠60只,隨機分成6組,每組10只,即正常對照組、模型組、GSE低劑量組、GSE中劑量組、GSE高劑量組、聯(lián)苯雙酯組。每日上午,除正常對照組灌胃給予植物油0.2mL/10g以外,其余各組灌胃給予2%CCl<,4>油溶液0.2mL/10g。下午各實驗組組按(50、250、500mg/

3、kg)的劑量灌胃給予噴霧干燥法所干燥的葡萄籽提取物,空白對照組和模型組均灌胃給予等量生理鹽水,連續(xù)10d;BCG聯(lián)合LPS誘導(dǎo)免疫性肝損傷動物模型的復(fù)制及劑量分組:取雄性昆明種小鼠72只,隨機分成6組,每組12只,即正常對照組、模型組、GSE低劑量組、GSE中劑量組、GSE高劑量組、聯(lián)苯雙酯組。實驗正式開始第一天,除正常對照組尾靜脈注射生理鹽水0.2ml外,其余小鼠均經(jīng)尾靜脈注射BCG 0.2ml(含5×10<'7>個活菌)的生理鹽水懸

4、液。次日起各實驗組按(50、250、500mg/kg)的劑量灌胃給予噴霧干燥法所干燥的葡萄籽提取物。連續(xù)12d,末次灌胃1h后,各干預(yù)組小鼠均經(jīng)尾靜脈注射LPS生理鹽水溶液7.5μg/只,正常對照組尾靜脈注射等容量的生理鹽水。3)指標測定:CCl<,4>所致急性化學(xué)性肝損傷動物和BCG聯(lián)合LPS誘導(dǎo)免疫性肝損傷動物分別在末次給藥后10h、12h摘眼球取血,測定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)含量,摘取肝臟

5、、脾臟,稱重,分別計算肝臟、脾臟系數(shù):測定肝組織超氧化物歧化酶(SOD)含量、丙二醛(MDA)的含量,并觀察肝臟病理組織學(xué)變化。結(jié)果:1)噴霧干燥所得葡萄籽提取物的抗氧化活性影響較自然干燥所得產(chǎn)物強;2)GSE各劑量組均能使CCl<,4>所致小鼠急性化學(xué)性肝損傷小鼠肝組織MDA含量降低(P<0.01);使肝組織SOD活性升高(P<0.01);能明顯降低小鼠血清ALT、AST的活性(P<0.01);并能不同程度地改善肝臟組織病理性損傷。G

6、SE各劑量組均可降低BCG聯(lián)合LPS誘導(dǎo)免疫性肝損傷動物的肝臟系數(shù)和脾臟系數(shù)(P<0.01);并降低肝組織MDA含量(P<0.01);升高肝組織SOD活性(P<0.01);GSE中、高劑量組可明顯降低小鼠血清ALT、AST的活性(P<0.05);并能不同程度地改善肝臟組織病理性損傷。結(jié)論:1)噴霧干燥法對GSE抗氧化活性影響很小,適用于工業(yè)生產(chǎn);2)GSE對CCl<,4>所致急性化學(xué)性肝損傷和BCG聯(lián)合LPS誘導(dǎo)的免疫性肝損傷均有一定的

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