1、目的:桂枝茯苓膠囊(Guizhi Fuling Capsule，GZFLC)是臨床上治療子宮肌瘤的常用中藥之一，但是目前關(guān)于GZFLC治療子宮肌瘤的作用機(jī)制尚不明確。本研究通過觀察GZFLC含藥血清對體外培養(yǎng)子宮平滑肌瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響，探討其作用機(jī)制，為臨床上子宮肌瘤的有效藥物治療提供新思路。
　　方法:(1)取SD大鼠60只隨機(jī)分為生理鹽水灌胃組和GZFLC灌胃組，分別制備空白血清和GZFLC含藥血清。(2)用膠原酶消化法

2、原代培養(yǎng)子宮平滑肌瘤細(xì)胞，用免疫細(xì)胞化學(xué)染色SP法進(jìn)行細(xì)胞鑒定。(3)檢測細(xì)胞增殖活性及抑制率:不同濃度GZFLC含藥血清(10％，20％，30％)作用不同時間(12h，24h，36h，48h，72h)，用CCK8法檢測細(xì)胞增殖活性及抑制率。(4)檢測細(xì)胞凋亡率:20％GZFLC含藥血清分別作用不同時間(12h，24h，36h，48h，72h)，運用AnnexinⅤ-FITC/PI雙標(biāo)記流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡來選取藥物最佳作用時間;在最

3、佳作用時間下，加入不同濃度GZFLC含藥血清(10％，20％，30％)，用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡來確定最佳含藥血清濃度。(5)選取細(xì)胞凋亡率最佳組提取蛋白，通過蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)分析GZFLC含藥血清對子宮肌瘤細(xì)胞凋亡相關(guān)的14-3-3γ通路上14-3-3γ及其下游TSC2和FOXO蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:(1)在10％～30％濃度范圍內(nèi)，GZFLC含藥血清濃度越高，細(xì)胞抑制率越高;不同濃度GZFLC含藥

4、血清均在36h時間點抑制率達(dá)高峰，此后呈衰減趨勢，72h后出現(xiàn)促增殖作用。(2)細(xì)胞凋亡率有劑量依賴性，在10％～30％濃度范圍內(nèi)，細(xì)胞凋亡率隨含藥血清濃度升高而升高;GZFLC含藥血清作用12h時凋亡率達(dá)高峰，隨后下降，36h時間點再次出現(xiàn)凋亡高峰。(3) GZFLC含藥血清作用后子宮肌瘤細(xì)胞TSC2、FOXO、14-3-3γ的表達(dá)均有顯著性差異。
　　結(jié)論:GZFLC含藥血清能有效抑制子宮平滑肌瘤細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)肌瘤細(xì)胞凋亡，