1、研究背景:
　　寒冷是常見的環(huán)境因素，當機體暴露于寒冷環(huán)境時，若防護措施不當或暴露時間過長便會對機體造成損傷，影響健康，甚至威脅生命。寒冷可以顯著降低人的勞動能力。對于軍隊而言，寒冷環(huán)境的暴露可能嚴重削弱部隊的戰(zhàn)斗力。因此，研究寒冷對人體的損傷機制和防護措施，無論對保護人民的生產作業(yè)能力，還是提高部隊寒冷環(huán)境下的戰(zhàn)斗力都至關重要。
　　我們實驗室以往研究發(fā)現PI3K-Akt調控通路參與急性冷暴露時肝臟能量代謝和損傷的發(fā)生，但

2、其機制還尚不清楚。本實驗通過對急性冷暴露環(huán)境下肝臟損傷的機理加以探討，同時通過模擬現實生活規(guī)律建立冷適應動物模型，探討冷適應對機體提高寒冷耐受能力和肝臟耐受急性冷暴露損傷的機制，為以后采取提高機體的防護措施提供依據。
　　研究目的:
　　研究間歇性冷暴露提高機體抗寒能力及其可能機制。
　　研究方法:
　　1.建立急性冷暴露引起肝損傷的動物模型，通過模擬現實作業(yè)規(guī)律進行間歇性冷暴露建立冷適應動物模型。
　　2

3、.通過TUENL染色的方法研究大鼠肝細胞凋亡情況，利用線粒體提取試劑盒提取線粒體，根據JC-1發(fā)光原理檢測線粒體膜電位。
　　3.采用透射電鏡方法觀察冷暴露對大鼠肝臟超微結構的影響。
　　4.利用Western blot方法研究冷暴露對線粒體融合相關蛋白、Caspase3的表達水平及Akt和ERK磷酸化水平的影響。
　　研究結果:
　　1.在急性冷暴露過程中，隨著暴露時間的延長，大鼠中心體溫逐漸降低；在暴露4h時

4、，中心體溫顯著降低，血清谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶升高，肝功能受損。
　　2.通過對大鼠肝臟細胞凋亡檢測發(fā)現急性冷暴露4h后大鼠肝細胞的凋亡水平顯著增加，具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；隨著冷暴露時間的增加，大鼠肝臟內Caspase3活性逐漸增加。
　　3.對線粒體膜電位檢測發(fā)現，急性冷暴露4h時，大鼠肝臟線粒體膜電位較對照組降低；透射電鏡結果顯示急性冷暴露4h后大鼠肝臟線粒體透光度增加，腫脹明顯，小線粒體較多；Wentern

5、blot檢測結果顯示大鼠肝細胞線粒體融合蛋白mfn1/2在在冷暴露1h較對照組升高，但隨著暴露時間延長而顯著下降；ERK磷酸化水平隨著冷暴露時間的增加逐漸降低；Akt的磷酸化水平在冷暴露1h時較對照有一過性增加，之后逐漸降低，在4h時顯著低于對照組。
　　4.冷適應大鼠接受急性冷暴露時，中心體溫下降程度較單純急性冷暴露組顯著降低（p<0.01）；其肝臟細胞凋亡數量也較急性冷暴露組減少（p<0.05），ERK和Akt磷酸化水平以及線