1、2-DG抗癇作用的評價
　　目的:探討2-DG抗癇作用的療效。
　　方法:6-8周成年雄性C57BL/6小鼠進行隨機分配為對照組、致癇組、2-DG干預組，建立匹羅卡品致癇模型。對不同組行為學的變化進行監(jiān)測，觀察其自發(fā)性癇性發(fā)作的癲癇潛伏期、癲癇評分、癇性發(fā)作持續(xù)時間，同時觀察不同組腦電圖的變化。
　　結果:
　　1.對不同組（對照組、致癇組、2-DG干預組）行為學監(jiān)測顯示:與對照組相比，匹羅卡品致癇后，致癇組、2

2、-DG干預組41.5％的C57BL/6小鼠存在自發(fā)性癇性發(fā)作。相對于致癇組，中、高劑量2-DG干預組小鼠潛伏期增加，癲癇發(fā)作評分、癇性發(fā)作持續(xù)時間降低（癲癇潛伏期:15±4分鐘VS35±4、33±5分鐘;癲癇評分為5.1±0.5 VS3.9±0.4、3.8±0.5;癇性發(fā)作持續(xù)時間為122±7分鐘VS35±6分鐘、42±7分鐘），而且有統(tǒng)計學意義。
　　2.對不同組（對照組、致癇組、2-DG干預組）腦電圖監(jiān)測顯示:對照組腦電圖是以

3、α、β波為主且波幅較小;匹羅卡品致癇模型組可見大量的尖波、棘波和尖慢波;2-DG干預組腦電圖是也主要是以α、β波為主且波幅較小。
　　結論:
　　2-DG在匹羅卡品癲癇模型中具有抗癇作用。
　　2-DG上調KATP亞基Kir6.1、Kir6.2發(fā)揮抗癇作用
　　目的:研究糖酵解抑制劑2-DG對ATP依賴性鉀離子通道亞基Kir6.1、Kir6.2mRNA和蛋白表達的影響與抗癇作用的關系。
　　方法:
　

4、　1.6-8周成年雄性C57BL/6小鼠進行隨機分配為對照組、致癇組、2-DG干預組，建立匹羅卡品致癇小鼠模型。將造模成功的小鼠（致癇組，2-DG干預組）在癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)后4小時、1天、7天、30天、60天和正常生理鹽水對照組（各組n=4-6）的海馬組織應用Real-time PCR方法檢測使用糖酵解抑制劑2-DG前后各組小鼠海馬組織中ATP敏感性鉀通道亞基Kir6.1、Kir6.2mRNA的變化。
　　2.將造模成功的小鼠

5、（致癇組、2-DG干預組）在癲癇持續(xù)狀態(tài)(SE)后4小時、1天、7天、30天、60天和對照組（各組n=4-6）的海馬組織應用western-blot方法檢測糖酵解抑制劑2-DG前后各組小鼠海馬組織中ATP敏感性鉀通道亞基Kir6.1、Kir6.2mRNA蛋白的變化。
　　結果:
　　1.相對于對照組，在第1、7、30天致癇組小鼠海馬組織Kir6.1和Kir6.2 mRNAs上調，而且有統(tǒng)計學意義;相對于致癇組，在第1、7、3

6、0天中、高劑量2-DG干預組海馬組織Kir6.1和Kir6.2 mRNAs上調，而且有統(tǒng)計學意義。在其它時間點差異不明顯。
　　2.相對于對照組，在第1和30天致癇組小鼠海馬組織Kir6.1蛋白上調，而且有統(tǒng)計學意義;在第1、7天致癇組小鼠海馬組織Kir6.2蛋白上調，而且有統(tǒng)計學意義;相對于致癇組，在第1天中、高劑量2-DG干預組海馬組織Kir6.1蛋白上調，而且有統(tǒng)計學意義。在第1、7、30天中、高劑量2-DG干預組海馬組織K

7、ir6.2蛋白上調，而且有統(tǒng)計學意義。在其它時間點差異不明顯。
　　結論:
　　糖酵解抑制劑2脫氧葡萄糖上調KATP亞基Kir6.1、Kir6.2 mRNA和蛋白表達發(fā)揮抗癇作用。
　　2-DG經(jīng)KATP通道抗癇作用機制體外實驗研究
　　目的:探討2-DG經(jīng)KATP通道抗癇作用的機制
　　方法:
　　1.在體外海馬腦片CA3區(qū)，給予10uM荷包牡丹堿、7.5mM高鉀模擬癇性發(fā)作，誘發(fā)動作電位頻率增加，

8、應用盲法膜片鉗技術監(jiān)測使用10mM2-DG前后神經(jīng)元細胞動作電位頻率的變化。
　　2.在體外海馬腦片CA3上，高頻電刺激誘發(fā)LTPGlu模擬致癇模型，記錄給予2-DG后海馬腦片CA3區(qū)神經(jīng)元LTPGlu(谷氨酸介導突觸傳遞的長時程增強)的變化;給予KATP通道激活劑Diazoxide（300nM），LTPGlu的變化以及在KATP通道抑制劑Gliben(20uM)預處理后給予10mM2DG后LTPGlu的變化。
　　結果:<

9、br>　　1.在體外海馬腦片CA3區(qū)上，10mM2-DG降低荷包牡丹堿和高鉀致癇模型的動作電位頻率。
　　2.在體外海馬腦片CA3區(qū)上，高頻電刺激誘發(fā)LTPGlu模擬致癇模型，10mM2-DG阻擋高頻電刺激誘發(fā)LTPGlu。
　　3.Kir6.2通道激動劑Diazoxide(300nM)阻擋高頻電刺激誘發(fā)海馬CA3區(qū)神經(jīng)元LTPGlu，Kir6.2通道阻斷劑Gliben(20uM)拮抗2-DG(10mM)阻擋高頻電刺激誘發(fā)海

10、馬CA3區(qū)神經(jīng)元LTPGlu作用。
　　結論:
　　2-DG在體外腦片致癇模型上具有抗癇作用，其機制是經(jīng)KATP通道的激活而發(fā)揮抗癇作用。
　　2-DG抗癇作用的信號通路研究
　　目的:研究糖酵解抑制劑2-DG抗癇作用的信號通路。
　　方法:
　　1.在體內匹羅卡品致癇模型上，采用Elisa技術記錄使用糖酵解抑制劑2-DG前后靜脈血中DAG的變化。
　　2.在體外海馬腦片上，高頻電刺激誘發(fā)LTP

11、Glu模擬致癇模型，給予PKC激動劑phorbol(PMA)預處理后，應用盲法膜片鉗技術記錄給予2-DG前后LTPGlu的變化。
　　結果:
　　1.在體內匹羅卡品致癇模型中，相對于對照組，在第1天致癇組小鼠靜脈血DAG上調，而且有統(tǒng)計學意義(p＜0.05）;在第7、30、60天致癇組小鼠靜脈DAG下調，其中第7、30天致癇組小鼠靜脈DAG下調有統(tǒng)計學意義(p＜0.05）。
　　2.相對于致癇組，在第1天中、高劑量2-

12、DG干預組小鼠靜脈DAG上調，而且有統(tǒng)計學意義(p＜0.01);在第7、30、60天中、高劑量2-DG干預組小鼠靜脈DAG下調，其中第7、30天致癇組小鼠靜脈DAG下調有統(tǒng)計學意義(p＜0.05），在其它時間點差異不明顯。
　　3.在體外海馬腦片上，PKC激動劑phorbol(500nM)拮抗2-DG(10mM)阻擋高頻電刺激誘發(fā)海馬CA3區(qū)神經(jīng)元LTPGlu作用
　　結論:
　　DAG的下降與2-DG的抗癇作用有關;