1、幽門螺桿菌(Helicobacterpylori,H.pylori)與胃癌的關(guān)系密切。細胞毒素相關(guān)基因A蛋白(cytotoxinasso-ciatedgeneA,CagA)是H.Pylori重要的毒力因子之一。依據(jù)CagA基因型的不同,H.pylori可以分為東亞型和西方型菌株。研究顯示,東亞型菌株的毒力強于西方型菌株。Bcl-xL是一種凋亡抑制基因,研究顯示,Bcl-xL基因在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要的作用。
　　 目的:<

2、br>　　 研究東亞型和西方型H.plyori刺激人胃癌細胞BGC-823后,對細胞中凋亡抑制基因Bcl-xL表達的影響。以此闡明東西方菌株之間的毒力差異和致病力的差異,以及影響菌株毒力差異的可能的機制,并探討B(tài)cl-xL基因在胃癌BGC-823細胞增殖中所起的作用。
　　 方法:
　　 1.分別用東亞型、西方型H.pylori菌株超聲裂解液刺激胃癌細胞BGC-823,MTT法分析刺激后胃癌BGC-823細胞增殖情況。

3、2.熒光定量PCR(RT-PCR)檢測胃癌細胞BGC-823凋亡抑制基因Bcl-xLmRNA表達水平。3.設(shè)計特異的Bcl-xLshRNA轉(zhuǎn)染胃癌BGC-823細胞,沉默Bcl-xL基因的表達。4.MTT法分析Bcl-xLshRNA轉(zhuǎn)染后的胃癌BGC-823細胞增殖抑制情況。
　　 結(jié)果:
　　 1.Hpylori超聲裂解液作用胃癌BGC-823細胞24h后,MTT顯示細胞增殖。與對照組相比,東亞型處理組細胞增值率為29

4、.7%(P＜0.01),西方型處理組細胞增值率為18.7%(P＜0.01);與西方型處理組相比,東亞型處理組細胞增值率更高(P＜0.05)。2.H.pylori超聲裂解液作用胃癌BGC-823細胞24h后,可以上調(diào)BGC-823細胞中Bcl-xLmRNA水平的表達。與對照組相比,東亞型處理組細胞中Bcl-xLmRNA水平上調(diào)了2.39倍(P＜0.01),西方型處理組細胞中Bcl-xLmRNA水平上調(diào)了2.06倍(P＜0.01);與西方型

5、處理組相比,東亞型處理組細胞中Bcl-xLmRNA水平表達量更高(P＜0.05)。3.Bci-xLshRNA可以沉默Bcl-xLmRNA、蛋白的表達。Bcl-xLshRNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染BGC-823細胞24h時后,與對照組及Bcl-xLshRNA陰性組相比,Bcl-xLmRNA水平明顯的下調(diào);轉(zhuǎn)染72h時后,與對照組及Bcl-xLshRNA陰性組相比,Bcl-xL蛋白表達水平也明顯下調(diào)。4.Bcl-xLshRNA質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)染BGC-823細

6、胞24h、48h和72h后,與對照組及Bcl-xLshRNA陰性組相比,BGC-823細胞的增殖抑制率分別為7.5%、24.7%、53%(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1.H.pylori超聲裂解液中的生物活性物質(zhì)通過上調(diào)Bcl-xL基因的表達促進胃癌BGC-823細胞的增殖,并且東亞型H.pylori比兩方型H.pylori具有更強的生物活性。2.Bcl-xLshRNA可以下調(diào)胃癌B