1、目的：上皮鈣粘蛋白(Epithelial cadherin,E-cad)是細(xì)胞粘附分子家族重要成員，在體內(nèi)以組織型和可溶型兩種形式存在，組織型E-cad 120KDa在特定條件下可經(jīng)蛋白水解酶脫落成80KDa的可溶性E-cad(Soluble E-cad,sE-cad)。因此，E-cad又稱細(xì)胞CAMl20/80，主要介導(dǎo)細(xì)胞間的緊密連接。在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用尤為重要。大量研究表明：腫瘤組織中，E-cad的表達(dá)下降或喪失與腫瘤的低分化、浸

2、潤(rùn)生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。E-cad表達(dá)下降提示腫瘤預(yù)后不良，但對(duì)E-cad血清學(xué)的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。臨床中胃癌是最具侵襲性且較常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，常常伴隨血行播散、腹腔種植轉(zhuǎn)移和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差。本研究旨在通過(guò)免疫組織化學(xué)和酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)從蛋白水平檢測(cè)E-cad在胃癌患者組織和血液中的表達(dá)特點(diǎn)及其與胃癌臨床病理因素的關(guān)系，以探討E-cad的作用與功能，并有助于篩選出一類(lèi)新的有臨床應(yīng)用價(jià)值的腫瘤學(xué)標(biāo)志物。為此，本課題設(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)。

3、 方法： 1研究對(duì)象及標(biāo)本采集①收集天津市腫瘤醫(yī)院2006年3月-2006年6月手術(shù)切除的胃癌標(biāo)本32例，所有標(biāo)本術(shù)后立即分別在癌灶中央和距邊緣5.0cm外的癌旁粘膜組織處取材，石蠟包埋標(biāo)本。②同時(shí)收集同期接受手術(shù)治療的胃癌患者術(shù)前血清樣本32例，所有患者均空腹過(guò)夜，并在次日清晨采外周靜脈血，離心分離血清后，-80℃保存待測(cè)。另選正常對(duì)照30例，均為健康獻(xiàn)血者。 2標(biāo)本檢測(cè)①采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)E-cad在胃癌和癌旁正常胃粘

4、膜組織中的表達(dá)。②采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)技術(shù)檢測(cè)32例胃癌患者血清sE-cad濃度，并與30名正常健康人作對(duì)照。 結(jié)果： E-cad在胃癌組織中的表達(dá)1 E-cad正常表達(dá)的細(xì)胞，染色主要集中于細(xì)胞膜，部分胞質(zhì)有均勻淡染，胃癌組織可見(jiàn)明顯的異質(zhì)性表達(dá)，表現(xiàn)為胞質(zhì)濃染，或E-cad片狀聚集，少量細(xì)胞核染色。 2.E-cad在胃癌組織中的異常表達(dá)率與癌旁正常組織相比差異具有顯著性，53.12％(17/32)

5、vs 100.00％(32/32)(P＜0.001)。 E-cad與胃癌臨床病理特征的關(guān)系1依據(jù)WHO病理分型，32例胃癌中：E-cad表達(dá)陽(yáng)性率分別為乳頭狀腺癌100.00％(4/4)、管狀腺癌66.67％(2/3)、粘液腺癌54.55％(6/11)、印戒細(xì)胞癌33.33％(2/6)、低分化腺癌37.50％(3/8)。 2依據(jù)Lauren病理分型，腸型胃癌E-cad表達(dá)陽(yáng)性率顯著高于彌漫型胃癌，92.31％(12/13

6、)vs 26.32％(5/19)(P＜0.05)。 3.E-cad在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性的腫瘤組織中陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性的病例，62.96％(17/27)vs0.00％(0/5)(P＜0.05)。 4 E-cad在浸潤(rùn)深度未達(dá)漿膜的腫瘤組織陽(yáng)性表達(dá)率與浸潤(rùn)深達(dá)漿膜的組織比較無(wú)顯著差異，61.90％(13/21)vs36.36％(4/11)(P＞0.05)。 5 E-cad在腫瘤分期為Ⅰ、Ⅱ期的腫瘤組織中表達(dá)陽(yáng)性率顯

7、著高于腫瘤分期為Ⅲ、Ⅳ期的病例，83.33％(15/18)vs14.29％(2/14)(P＜0.05)。 胃癌患者血清sE-cad含量所有胃癌患者和正常血清中均能檢測(cè)出sE-cad水平。且胃癌組sE-cad水平明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.001)。 sE-cad表達(dá)水平與胃癌臨床病理因素的關(guān)系1 sE-cad表達(dá)水平與胃癌TNM分期、胃壁浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在顯著相關(guān)性(P＜0.05.)。 2不同分化的胃癌組織中，

8、低分化腺癌組略高于高分化腺癌組，但兩組間比較無(wú)顯著性差異(P=0.454)。腺癌組與粘液癌組之間也無(wú)明顯差異(P=0.844)。 結(jié)論： 1在胃癌中普遍存在E-cad的異常表達(dá)，提示E-cad表達(dá)下降是胃癌區(qū)別于正常組織較早期的分子事件，與胃癌轉(zhuǎn)移發(fā)生有關(guān)，可作為早期診療的輔助指標(biāo)。 2.E-cad表達(dá)下降可作為早期預(yù)測(cè)胃癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移程度及評(píng)價(jià)預(yù)后的有效指標(biāo)。 3胃癌患者外周血中sE-cad含量顯著上升，