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1、目的: 建立穩(wěn)定的大鼠皮膚移植排斥反應(yīng)模型,探討輸注供體未成熟樹突狀細(xì)胞減輕排斥反應(yīng)和誘導(dǎo)免疫耐受的作用。 方法: 通過建立大鼠自體皮膚移植模型,熟練掌握大鼠皮膚移植方法。繼而用改良的方法擴(kuò)增未成熟樹突狀細(xì)胞: rhG-CSF,5μg/kg,皮下注射,連續(xù)7天后,從骨髓分離、提取樹突狀細(xì)胞,體外培養(yǎng)3d。實(shí)驗(yàn)分組:自體移植組、對(duì)照1組SD→Wistar、對(duì)照2組Wistar→Wistar、和imDC實(shí)驗(yàn)組SD→W
2、istar,配對(duì)組合皮膚移植。于皮膚移植術(shù)中經(jīng)陰莖背靜脈輸注供體未成熟樹突狀細(xì)胞5×106個(gè),動(dòng)態(tài)觀察術(shù)后移植皮膚的存活時(shí)間,不同組別移植物病理改變,探討供體imD減輕大鼠皮膚移植免疫排斥反應(yīng)的作用。 結(jié)果: 1、全部自體移植皮片至觀察終點(diǎn)(>2月)仍然存活,移植皮片與周圍組織愈合良好,無缺損或破潰,色澤與周圍組織無明顯區(qū)別。移植物表皮及附屬毛發(fā)、毛囊生長(zhǎng)良好。術(shù)后14d鏡下觀察移植物病理切片可見:各組織層次清晰完整,皮
3、膚附屬結(jié)構(gòu)完好,可以看到完整的毛囊結(jié)構(gòu),細(xì)胞結(jié)構(gòu)完好,無明顯的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。 2.對(duì)照1組,移植皮片在14天內(nèi)全部被排斥掉,排斥反應(yīng)發(fā)生早,且嚴(yán)重。移植物的平均存活時(shí)間僅為11.8±1.6d,最短者于術(shù)后第9d完全排斥。 3.對(duì)照2組:Wistar→Wistar組,雖然移植物最終全部被排斥,但排斥反應(yīng)發(fā)生晚且較輕,平均生存期為23.1±2.4d。移植物最長(zhǎng)存活27d,最短存活19d。術(shù)后14d鏡下移植物病理切片表現(xiàn):移植
4、物組織結(jié)構(gòu)不完整,附屬結(jié)構(gòu)被破壞,未見正常毛囊結(jié)構(gòu),可見部分壞死灶,有大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。于高倍鏡下可見組織細(xì)胞核溶解、碎裂。 4.實(shí)驗(yàn)組,全部移植物在25d內(nèi)被排斥,存活時(shí)間最短14d,平均存活時(shí)間為19.3±3.4d,最短14d。術(shù)后14d鏡下移植物病理切片表現(xiàn):移植物組織結(jié)構(gòu)遭破壞,可見壞死灶,有大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。于高倍鏡下可見組織細(xì)胞核溶解、碎裂。 結(jié)論: 使用供體imDC預(yù)處理受體鼠可以顯著延長(zhǎng)移植物的存活時(shí)
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