1、南方醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文胃癌患者血清RASSF1A基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化檢測(cè)及臨床意義姓名：劉暢申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化內(nèi)科）指導(dǎo)教師：朱人敏20090602摘要化研究具有一定的臨床前景。目前胃癌患者血清R A S S F l A 啟動(dòng)子異常甲基化方面的研究十分有限，國(guó)內(nèi)尚未見報(bào)道?！灸康摹恳酝哪[瘤標(biāo)志物如C E A 對(duì)胃癌診斷來說有很多的局限性。尋找新的腫瘤標(biāo)志物為胃癌的早期診斷提供前景。本研究的主要目的是檢測(cè)胃癌患者血清、

2、腫瘤組織及癌旁組織R A S S F l A 基因啟動(dòng)子區(qū)異常甲基化情況，并探討其與臨床參數(shù)之間的關(guān)系，探討其在胃癌早期診斷和預(yù)后評(píng)估中的可能作用?！静牧虾头椒ā考谆禺愋跃酆厦告湻磻?yīng)( m e t h y l a t i o n s p e c i a lP C R ，M S P ) 是一種快速、敏感的基因甲基化檢測(cè)方法，靈敏度高，可用于微量分析和同源基因分析，該方法不僅能避免限制性內(nèi)切酶消化不完全所致的假陰性，而且假陽性率低，為檢

3、測(cè)血清離微量基因甲基化提供了可能。它將D N A 先用重亞硫酸鹽處理，這樣未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏ぃ谆牟蛔?，隨后行引物特異性的P C R 。M S - P C R 中設(shè)計(jì)兩對(duì)引物，并要求：1 ．引物末端均設(shè)計(jì)至檢測(cè)位點(diǎn)結(jié)束；2 。兩對(duì)引物分別只能與重亞硫酸鹽處理后的序列互補(bǔ)配對(duì)，即一對(duì)結(jié)合處理后的甲基化D N A 鏈，另一對(duì)結(jié)合處理后的非甲基化D N A 鏈。檢測(cè)M S P 擴(kuò)增產(chǎn)物，如果用針對(duì)處理后甲基化D N A 鏈的引