1、人類8型皰疹病毒（human herpesvirus8，HHV-8）可導致卡波西肉瘤及多種腫瘤，是最常見的艾滋病相關病毒之一。隨著艾滋病人的日益增多，HHV-8的研究越來越受到重視。HHV-8感染有潛伏和裂解兩個狀態(tài)，由其ORF50基因編碼的復制與轉錄激活蛋白（replication and transcription activator，RTA）的表達為病毒重激活所必需，并足以完成HHV-8從潛伏態(tài)到裂解態(tài)的轉換。RTA能與靶基因啟動

2、子上的RTA應答元件（RTA response element，RRE）序列直接結合，激活靶基因的轉錄表達，也能通過與細胞內(nèi)蛋白的相互作用間接與靶序列結合，激活下游基因的表達。干擾素是治療病毒性疾病的常用藥物之一，其在體內(nèi)的表達主要受干擾素調(diào)節(jié)因子（interferon regulatory factors，IRFs）調(diào)控。干擾素調(diào)節(jié)因子7（interferon regulatory factors7，IRF-7）是IRFs家族中的一個

3、重要成員，能控制I型干擾素依賴的免疫反應。病毒感染細胞后，IRF-7將被磷酸化入細胞核，啟動下游靶基因的轉錄，發(fā)揮抗病毒效應。IRF-7還可直接作用于病毒啟動子，抑制病毒的激活。研究表明，IRF-7可以競爭性結合HHV-8 ORF57啟動子上的RTA結合位點，從而抑制RTA激活ORF57啟動子。但RF-7是否可以抑制RTA激活其它啟動子，影響病毒基因表達目前尚未有報道。 本研究表達和純化了RTA、ORF57、IRF-7和GST蛋

4、白，并制備其多克隆抗體。蛋白免疫印跡顯示所制備的多克隆抗體具有較高的滴度和良好的特異性。將IRF-7與RTA的表達質(zhì)粒和ORF57報告質(zhì)粒共轉染293T細胞，觀察到IRF-7能抑制RTA對ORF57啟動子的激活功能，且抑制作用呈現(xiàn)出劑量依賴效應。將IRF-7與RTA的表達質(zhì)粒和PAN報告質(zhì)粒共轉染293T細胞，發(fā)現(xiàn)IRF-7能抑制RTA對PAN啟動子的激活功能，且抑制作用呈現(xiàn)出劑量依賴效應。將野生性IRF-7和賴氨酸突變型IRF-7分別

5、與RTA的表達質(zhì)粒和ORF57報告質(zhì)粒共轉染293T細胞，發(fā)現(xiàn)不同賴氨酸突變IRF-7抑制RTA激活ORF57啟動子的效果不同。將野生型IRF-7和賴氨酸突變型IRF-7分別與RTA的表達質(zhì)粒和PAN報告質(zhì)粒共轉染293T細胞，發(fā)現(xiàn)不同賴氨酸突變型IRF-7抑制RTA對PAN啟動子的激活功能也不同；而且不同突變對RTA激活ORF57與PAN啟動子的抑制作用的趨勢也不盡相同。我們還將RTA以及IRF-7的真核表達質(zhì)粒共轉染293T細胞，利