1、肝硬化(hepatic cirrhosis)是由多種原因引起的肝臟損害，表現(xiàn)為肝細胞變性壞死，纖維組織增生，肝細胞結(jié)節(jié)狀再生，肝小葉結(jié)構(gòu)變形，血液循環(huán)途徑被改建，最終導致肝硬化。根據(jù)病因分類，肝硬化主要有病毒性肝硬化、酒精性肝硬化、膽汁性肝硬化、自身免疫性肝硬化及隱原性肝硬化等。我國以病毒性肝硬化為主，其中主要為乙型肝炎病毒感染造成，很多病人無法長期規(guī)范化治療最終致肝硬化。肝硬化病人有門脈高壓和肝功能障礙，病人常因消化道大出血和肝性腦病

2、死亡。因此，肝硬化治療是一項長期艱巨的任務，有效的方法為肝移植，因肝臟供體少，臨床工作難以大量展開，越來越多的研究者致力于研究能替代肝移植的方法，間充質(zhì)干細胞成為新的方向。
　　 間充質(zhì)干細胞(Mesenchymal stem cells，MSCs)屬于干細胞家族，主要存在于骨髓、臍帶、臍血和胚胎中。因具有多向分化潛能、造血支持、免疫調(diào)控和自我復制等特點，受到人們的關注。間充質(zhì)干細胞在體內(nèi)或體外誘導條件下可以分化為骨、軟骨、脂肪

3、、肌肉、肌腱、神經(jīng)、類肝細胞、心肌等組織細胞，連續(xù)傳代后仍具有多向分化潛能，可作為理想種子細胞用于炎癥病變及衰老引起的器官修復。骨髓間充質(zhì)干細胞應用于臨床較早，但抽取骨髓為有創(chuàng)性檢查，增加了病人痛苦，越來越多的學者致力于研究臍帶來源的間充質(zhì)干細胞。臍帶間充質(zhì)干細胞來源廣泛，收集臍帶為無創(chuàng)操作，且治療肝硬化有促進肝臟再生、提高患者生活質(zhì)量的作用，在臨床上應用越來越受到重視。
　　 目的：制備足月順產(chǎn)胎兒臍帶來源的間充質(zhì)干細胞，探討

4、體外分離、培養(yǎng)、鑒定方法，觀察臍帶間充質(zhì)干細胞治療終末期肝硬化的臨床療效。
　　 方法：無菌條件下采集新生兒臍帶，經(jīng)過分離，培養(yǎng)獲得間充質(zhì)干細胞，流式細胞儀表面抗原測定（CD29、CD105、CD34、CD45）；選擇50例肝硬化患者,26例患者在內(nèi)科治療基礎上經(jīng)前臂靜脈或肝動脈插管進行MSCs移植，術(shù)后定期檢測肝功能、凝血功能及臨床癥狀，并觀察同期的癥狀體征和不良反應，同時隨機選擇24例僅以內(nèi)科治療的肝硬化患者做為對照組，兩組

5、間進行比較。
　　 結(jié)果：(1)培養(yǎng)的臍帶間充質(zhì)干細胞呈長梭形、旋渦狀生長。P1代消化后傳代，貼壁時間約48h左右,2-3W長滿80％。P6代以內(nèi)的細胞增殖無明顯差異。P3-P6代生長速度較快,24h貼壁,48h長滿70％,72h長滿80％,P3-P6代內(nèi)無明顯分化。
　　 (2)細胞免疫表型顯示表達間充質(zhì)干細胞的特異性標記CD29；但不表達造血干細胞表面標記CD34、CD45。這與骨髓間充質(zhì)干細胞的表型一致。
　

6、　 (3)臍帶間充質(zhì)干細胞移植后，治療組ALB、PA和Fbg 水平比對照組明顯升高(P﹤0.05),PT 時間與對照組相比明顯降低(P﹤0.05)。
　　 (4)治療組患者從治療后1周開始，乏力、腹脹、納差明顯好轉(zhuǎn)，12周后患者腹水明顯減少。26例移植患者術(shù)中未出現(xiàn)嚴重不良反應，無與移植相關的嚴重并發(fā)癥。
　　 結(jié)論：
　　 (1)本實驗用雙酶消化法分離出間充質(zhì)干細胞，經(jīng)過凍存、復蘇后細胞損傷小，多次傳代后細胞