1、第一部分GFP陽性大鼠胚胎脊髓源性神經(jīng)干細胞的獲取和鑒定
　　目的：探討GFP(綠色熒光蛋白)陽性大鼠胚胎脊髓源性神經(jīng)干細胞（Neural stem cells,NSCs）的獲取，并對所獲取細胞進行相關(guān)鑒定，為第二步實驗提供實驗細胞基礎(chǔ)。
　　方法：顯微解剖分離胚胎大鼠脊髓組織,用酶消化和機械分離法制成單細胞懸液,在含有表皮生長因子(EGF)、堿性成纖維生長因子(bFGF)及N2、B27的DMEM/F12無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng),

2、傳代后分別在相差顯微鏡下進行形態(tài)學(xué)觀察并用免疫細胞化學(xué)方法鑒定巢蛋白（Nestin）、神經(jīng)元核蛋白（Neuronal nuclei，NeuN）及膠質(zhì)纖維酸性蛋白（Glial fibrillary acidic protein，GFAP）的表達。
　　結(jié)果：分離獲取的GFP陽性大鼠胚胎脊髓源神經(jīng)干細胞在無血清培養(yǎng)基（Serum free medium，SFM）中生長良好，原代及傳代培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞表達巢蛋白(nestin)；而且用血

3、清誘導(dǎo)分化后神經(jīng)干細胞均有NeuN和GFAP蛋白陽性表達。
　　結(jié)論：采用酶消化及機械吹打相結(jié)合的方法能從大鼠胚胎脊髓組織中獲得神經(jīng)干細胞（Neural stem cell，NSCs）,且保持完整的分化潛能，為下一步實驗奠定了基礎(chǔ)。
　　第二部分 MicroRNA-223與 RhoB在大鼠胚胎脊髓源性神經(jīng)干細胞中的表達及其相關(guān)性
　　目的：檢測miR-223及RhoB蛋白在脊髓源性神經(jīng)干細胞（Neural stem c

4、ells，NSCs）中的表達情況,并用統(tǒng)計學(xué)方法初步分析兩者的關(guān)系。
　　方法：選取E14天、E16天、E18及E20天的孕鼠，分離培養(yǎng)脊髓來源神經(jīng)干細胞（Neural stem cell，NSC），對4組細胞利用熒光定量PCR、western blot分別檢測miR-223和RhoB蛋白的表達,并且進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：熒光定量PCR檢測顯示miR-223在4組NSC細胞中都有表達,其中miR-223在18天組NSC

5、s中的表達明顯高于14天組、16天組、20天組，各組間的表達差異具有顯著性。利用Western blot檢測RhoB蛋白在4組NSC細胞中的表達,結(jié)果顯示RhoB在4組細胞中均有表達，在14天、16天組細胞中的表達最高，在18天及20天組的表達則相對較低。利用Gel-Pro analyzer灰度軟件將RhoB蛋白的Western blot結(jié)果進行條帶灰度分析,然后采用Spearman相關(guān)性統(tǒng)計學(xué)方法對miR-223的熒光定量PCR表達結(jié)