1、矮稈波蘭小麥(Trltlcum polonlcum L.，Dwarfing Pollsh Wheat，2n=4x=28，AABB)是顏濟(jì)、楊俊良教授采集于新疆吐魯番的1份新的四倍體小麥矮稈資源，是迄今為止波蘭小麥唯一的矮稈變異材料。細(xì)胞學(xué)研究的結(jié)果表明矮稈波蘭小麥具有基本的A、B染色體組，個(gè)別染色體有重排。利用SDS-PAGE方法，鑒定出矮稈波蘭小麥具有2個(gè)表達(dá)的高分子量谷蛋白亞基，1Ax-dp和1Bx-dp。為了從分子水平對(duì)矮稈波蘭小

2、麥的兩個(gè)亞基進(jìn)行研究，對(duì)亞基基因編碼區(qū)進(jìn)行了克隆并測(cè)序。同時(shí)，對(duì)其低分子量谷蛋白亞基也進(jìn)行了分子克隆及序列分析。所獲得的主要結(jié)果如下： 1.SDS-PAGE分析，結(jié)果表明矮稈波蘭小麥高分子量谷蛋白亞基(HMW-GS)組成包括2個(gè)表達(dá)的亞基，命名為1Ax-dp和1Bx-dp。在SDS-PAGE圖譜上，亞基1Bx-dp位于亞基1Axl和1Dx5之間，與亞基1Dx2非常接近；而亞基1Bx-dp的遷移率與1Bx7非常接近。 2.

3、利用一對(duì)擴(kuò)增高分子量谷蛋白亞基基因完整編碼區(qū)的引物，對(duì)矮稈波蘭小麥的總DNA進(jìn)行擴(kuò)增，獲得大小分別為1.8、2.3和2.5 kb的3個(gè)片斷。將3個(gè)片斷分別克隆、測(cè)序和進(jìn)行序列比較后，確定大小為1.8 kb的片斷是高分子量谷蛋白亞基1Ax-dp，但其發(fā)生了基因沉默(GeneBank登錄號(hào)：AY722710)；2.3kb和2.5 kb的片斷分別是高分子量谷蛋白亞基1Bx-dp和1Ax-dp的基因編碼區(qū)(V的GeneBank登錄號(hào)：AY722

4、709)。1Bx-dp和1Ax-dp推導(dǎo)的氨基酸一級(jí)結(jié)構(gòu)都由保守的信號(hào)肽、N-末端、C-末端和較長(zhǎng)的中部重復(fù)區(qū)組成。1Ax-dp全長(zhǎng)2508 bp，編碼815個(gè)氨基酸殘基；1Bx-dp全長(zhǎng)2385 bp，編碼795個(gè)氨基酸殘基。他們都含有4個(gè)半胱氨酸殘基，并且都具有x-型高分子量谷蛋白亞基的典型特征。根據(jù)氨基酸序列的多重比較表明，所有的x-型和y-型亞基分別聚成兩個(gè)大類(lèi)。1Ax-dp分別與來(lái)普通小麥和硬粒小麥的1Ax和1Ax2<'*>具

5、有較近的進(jìn)化關(guān)系；而1Bx-dp與1Bx7關(guān)系最近，并且與1Bx23和1Bx14具有較近的進(jìn)化關(guān)系。 3．根據(jù)Long(2005)設(shè)計(jì)的擴(kuò)增低分子量谷蛋白亞基(LMW-GS)的2對(duì)引物(GluA3F1/GluA3R1和GIuB3F1/GluB3R1)，采用PCR法對(duì)矮稈波蘭小麥的基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增，獲得兩條約為1100 bp的片斷，純化后克隆到載體pMD18-T后，對(duì)篩選陽(yáng)性克隆測(cè)序，獲得兩個(gè)基因LMW-DPI和LMW-DP2

6、(GeneBank登錄號(hào)：EF371504和EF371505). LMW-DP1全長(zhǎng)為819 bp，編碼273個(gè)氨基酸殘基；LMW-DP2全長(zhǎng)為831 bp，編碼277個(gè)氨基酸殘基。LMW-DPI含有8個(gè)半胱氨酸殘基，其中1個(gè)在N-末端，7個(gè)在C-末端：LMW-DP2也含有8個(gè)半胱氨酸殘基，其中1個(gè)在中央重復(fù)區(qū)，7個(gè)在C-末端。推導(dǎo)的氨基酸序列比較結(jié)果表明，LMW-DP1和LMW-DP2具有典型的LMW-GS特征。LMW-DP1和LMW