1、目的：通過體外試驗(yàn)研究不同濃度雌、孕激素對BeWo絨癌細(xì)胞系中Galectin-3的表達(dá)，探討17-β雌二醇(17-βE2)、甲羥孕酮(MPA)對滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲性Galectin-3基因表達(dá)的影響作用。 材料與方法： 1.細(xì)胞培養(yǎng)及激素處理 人絨毛膜癌細(xì)胞株BeWo常規(guī)培養(yǎng)于含10％的小牛血清F12培養(yǎng)液中，在37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)。細(xì)胞在生長對數(shù)期時轉(zhuǎn)入用活性炭處理的F12培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時后，用不同濃度

2、的17-β雌二醇(17-βE2)、甲羥孕酮(MPA)分別處理人絨毛膜癌細(xì)胞株BeWo24小時，收集細(xì)胞。 2.方法 1)免疫熒光對Galectin-3在人絨毛膜癌細(xì)胞株BeWo的定位和半定量檢測。 2)Westernblot分析處理的BeWo細(xì)胞株上的Galectin-3蛋白含量。 3)RT-PCR測定不同處理的BeWo細(xì)胞株上的Galectin-3mRNA含量。 結(jié)果： 1.免疫熒光分析

3、顯示Galectin-3在人絨毛膜癌細(xì)胞株BeWo有表達(dá)，蛋白主要定位于細(xì)胞漿中，細(xì)胞核有少量表達(dá)。10-8mol/L濃度雌激素處理的和10-7、10-6mol/L濃度孕激素處理的BeWo細(xì)胞顯色明顯高于對照組(P＜0.05)，10-5mol/L孕激素使Galectin-3表達(dá)降低(P＜0.05)，其余處理組無明顯差異。 2.Westernblot結(jié)果同上 3.RT-PCR結(jié)果顯示10-8mol/L濃度雌激素處理的和10

4、-7、10-6mol/L濃度孕激素處理的BeWo細(xì)胞Galectin-3mRNA含量均高于對照組(P＜0.05)，10-5mol/L孕激素使Galectin-3表達(dá)降低(P＜0.05)，其余處理組無明顯差異。 結(jié)論： 1.Galectin-3基因是一種多功能基因，存在于人絨毛膜癌細(xì)胞株BeWo上，說明該基因參與滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲能力的調(diào)控。 2.10倍于生理濃度(10-8mol/L)的雌激素可以上調(diào)滋養(yǎng)細(xì)胞中Galec

5、tin-3蛋白的表達(dá)，表明在類似于妊娠早期的雌激素時，通過增加該基因的表達(dá)調(diào)節(jié)滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲能力。 3.生理濃度和10倍于生理濃度(10-6mol/L)的孕激素可以增加滋養(yǎng)細(xì)胞中Galectin-3蛋白的表達(dá)，而100倍于生理濃度(10-5mol/L)的孕激素使滋養(yǎng)細(xì)胞中Galectin-3蛋白的表達(dá)降低，說明不同濃度的孕激素可對滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲力發(fā)揮不同作用。 4.Galectin-3基因的表達(dá)在不同濃度雌，孕激素作用下呈