反義Bmi-1質(zhì)粒的構(gòu)建及其對K562細(xì)胞增殖的抑制作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文反義Bmi-1質(zhì)粒的構(gòu)建及其對K562細(xì)胞增殖的抑制作用姓名:劉衛(wèi)紅申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師:孟秀香20050601臺(tái)盼藍(lán)染色法、M T T 法和體外克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測反義B m i .1 表達(dá)質(zhì)粒對K 5 6 2 細(xì)胞增殖的抑制作用。5 .利用流式細(xì)胞儀分析各組細(xì)胞的細(xì)胞周期情況。6 .采用免疫熒光組化法檢測反義B m i .1 對K 5 6 2 細(xì)胞的p 1 6 的上調(diào)作用。7 .采用D

2、N A l a d d e r 法檢測細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果 1 .轉(zhuǎn)染反義B m i .1 表達(dá)質(zhì)粒組與對照組( 空白對照組及空質(zhì)粒對照組) 相比較,生長速度明顯變慢,克隆形成能力明顯下降,空白對照組K 5 6 2 細(xì)胞集落數(shù)為( 1 1 0 .0 ±2 .8 3 ) /1 0 3 細(xì)胞,空質(zhì)粒對照組K 5 6 2 細(xì)胞集落數(shù)為( 1 1 7 .0 ±t .2 4 ) /1 0 3 細(xì)胞,轉(zhuǎn)染反義質(zhì)粒組K 5 6 2細(xì)

3、胞集落數(shù)為( 7 9 .5 ±6 .3 6 ) /1 0 3 細(xì)胞( D < 0 .0 1 ) 。但各組細(xì)胞間存活率未見顯著性差異。2 .轉(zhuǎn)染反義B m i .1 的K 5 6 2 細(xì)胞與對照組K 5 6 2 細(xì)胞相比,其G o /G ,期所占比例明顯上升。3 .與對照組相比,反義質(zhì)粒組p 1 6 蛋白表達(dá)明顯上調(diào)。4 .細(xì)胞凋亡檢測實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明各組實(shí)驗(yàn)細(xì)胞均未出現(xiàn)凋亡情況。結(jié)論本研究構(gòu)建的反義B m i .1 基因表

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