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![豬繁殖與呼吸綜合征病毒ORF5基因疫苗在小鼠體內(nèi)動態(tài)分布與表達.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/cb7a8892-8e3e-4eb1-a896-b6454c2557a1/cb7a8892-8e3e-4eb1-a896-b6454c2557a11.gif)
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文檔簡介
1、本研究將豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5分別以6μg基因槍轟擊和200μg、100μg、50μg肌肉注射以及100μg+100μg豬白介素2真核表達質(zhì)粒(pcDNA-IL-2)聯(lián)合肌肉注射的方法免疫BALB/c小鼠,免疫后不同時間分別取各組BALB/c小鼠胃、腸、肝、脾、腎、心、肺、免疫部位肌肉和腦等組織器官。通過PCR、原位雜交、原位PCR以及免疫組織化學(xué)方法檢測ORF5基因
2、疫苗以及ORF5基因疫苗表達產(chǎn)物在BALB/c小鼠體內(nèi)的動態(tài)分布規(guī)律。結(jié)果表明: ①液相PCR比原位雜交和間接原位PCR檢測的靈敏度高;②間接原位PCR比原位雜交靈敏度高,檢測到基因疫苗在被免疫BALB/c小鼠中存留時間更長并且檢測到雜交信號更強;③豬白介素2真核表達質(zhì)粒能延長ORF5基因疫苗在被免疫BALB/c小鼠肌肉中存留時間多達30d;④在肌肉注射ORF5基因疫苗組的BALB/c小鼠所取組織中,基因疫苗的劑量和基因疫苗在組
3、織中的存留時間呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系;⑤基因槍轟擊組雖然基因疫苗轟擊免疫的劑量很小,然而在被免疫的BALB/c小鼠中存留時間也很長,達到120d;⑥雖然基因槍轟擊基因疫苗劑量較少,基因槍轟擊組檢測到的基因疫苗表達產(chǎn)物的量卻超過同期肌肉注射組基因疫苗表達產(chǎn)物的量,同時在多種組織中基因疫苗都得到表達,這證明了基因槍轟擊和肌肉注射雖然都是ORF5基因疫苗良好的免疫途徑,但是基因槍轟擊免疫要優(yōu)于肌肉注射免疫;⑦豬白介素2真核表達質(zhì)粒同ORF5基因疫苗聯(lián)
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