1、顱頜面部骨缺損的修復(fù)和重建是口腔頜面外科領(lǐng)域的重大挑戰(zhàn)之一。傳統(tǒng)自體骨和異體骨移植都存在難以克服的問題。自固化磷酸鈣骨水泥(CPC)是常見的人工骨缺損修復(fù)材料之一。CPC是由兩種或多種不同磷酸鹽組成的粉末和固化液混合后常溫下固化形成的磷酸鹽復(fù)合物，具有良好的骨傳導(dǎo)性、生物相容性、可塑性，且可負(fù)載藥物和生物活性因子。但是，CPC降解緩慢、孔徑過小、孔隙率低的缺點不利于新骨長入。此外，CPC負(fù)載的BMP因釋放緩慢而生物效應(yīng)度低。本文通過系列

2、研究，旨在:(1)探索通過將負(fù)載rhBMP-2（和rhVEGF165）的明膠微粒(GM)摻入CPC，以優(yōu)化材料理化性能并改善生物活性因子控釋的可行性;(2)評價負(fù)載了rhBMP-2（和rhVEGF165）的CPC/GM復(fù)合材料對修復(fù)顱骨缺損和組織工程異位成骨的作用。
　　1.制備負(fù)載rhBMP-2的CPC/GM復(fù)合材料及其理化特性研究
　　將rhBMP-2/GM復(fù)合CPC制備圓柱狀rhBMP-2/CPC/GM人工骨塊。以rh

3、BMP-2/CPC人工骨塊為對照，通過掃描電鏡(SEM)、抗壓試驗、孔隙率測定等手段比較其固化時間、材料形貌、抗壓強(qiáng)度、孔隙率等。結(jié)果顯示，與對照組相比，實驗組材料的固化時間延長（30.3±1.7min vs.37.8±2.1min）、而抗壓強(qiáng)度降低（13.18±2.60MPa vs.30.05±5.84MPa）。體外浸泡二周后，實驗組的有效孔隙率顯著提高（44.83％±7.99％ vs.18.63％±4.26％）。SEM下可見實驗組G

4、M降解后形成了孔徑為100-350μm的大孔。
　　2.CPC/GM復(fù)合材料的生物相容性及負(fù)載因子的釋藥動力學(xué)和生物活性研究
　　ELISA法檢測不同時間段的不同人工骨塊浸泡液中生物活性因子含量并比較累積釋藥量。比較rhBMP-2/CPC、rhBMP-2/CPC/GM和CPC/GM人工骨塊的浸泡細(xì)胞培養(yǎng)液對兔BMSCs細(xì)胞增殖和成骨分化的作用。結(jié)果顯示:自第3天起，rhBMP-2/CPC/GM人工骨rhBMP-2的釋放明顯高

5、于rhBMP-2/CPC;第7-28天間CPC/GM負(fù)載的生物活性因子（rhBMP-2和rhVEGF165）釋放量-時間關(guān)系均為近似線性關(guān)系。各組材料浸泡液對細(xì)胞增殖活性無影響。rhBMP-2/CPC和rhBMP-2/CPC/GM浸泡液誘導(dǎo)了細(xì)胞成骨分化（細(xì)胞ALP活性高），且與釋放劑量有依存關(guān)系。
　　3.負(fù)載活性因子的CPC/GM自固化復(fù)合材料修復(fù)兔顱骨缺損的研究
　　分別以四種復(fù)合材料（GM/CPC、rhBMP-2/G

6、M/CPC、rhVEGF165/GM/CPC和rhBMP-2/rhVEGF165/GM/CPC）修補(bǔ)新西蘭大白兔的臨界顱骨缺損（Φ8mm）。通過對12周后的組織標(biāo)本進(jìn)行組織學(xué)觀察和組織形態(tài)測量，比較不同復(fù)合材料間的效果。結(jié)果顯示，負(fù)載生物活性因子可提高骨缺損區(qū)的新骨形成和材料降解，而復(fù)合應(yīng)用rhBMP-2/rhVEGF165有協(xié)同效應(yīng)。
　　4.負(fù)載生物活性因子的CPC/GM自固化復(fù)合材料在組織工程異位成骨中的作用
　　將四

7、組具人下頜髁突外形的復(fù)合支架（GM/CPC、rhBMP-2/GM/CPC、rhVEGF165/GM/CPC和rhBMP-2/rhVEGF165/GM/CPC）植入新西蘭兔的雙側(cè)背闊肌內(nèi)。對12周后回收植入標(biāo)本進(jìn)行組織學(xué)觀察，以綜合評價各組復(fù)合支架在的異位組織工程化骨效果。結(jié)果顯示，負(fù)載了rhBMP-2的兩組復(fù)合支架中有新骨形成但成骨量有限。
　　綜上結(jié)果，本研究顯示，通過負(fù)載生物活性因子的GM摻入CPC，可以在材料內(nèi)部形成尺寸適合