1、目的:觀察葡萄糖胺(GLcN)、羅格列酮鈉(RSG)對(duì)HIT-T15細(xì)胞線粒體形態(tài)、胰島素釋放、ATP/ADP的比值、核呼吸因子(NRFs)及過氧化物體增殖物激活受體γ共激活因子(PGC-1)表達(dá)的影響。初步探討RSG保護(hù)β細(xì)胞的機(jī)理。 方法:以SV40病毒轉(zhuǎn)化的敘利亞倉(cāng)鼠胰島β細(xì)胞株HIT-T15細(xì)胞作為研究對(duì)象，對(duì)GLcN、RSG進(jìn)行了以下方面的研究： 1.透射電鏡觀察HIT-T15細(xì)胞線粒體超微結(jié)構(gòu)。 2.

2、流式細(xì)胞儀檢測(cè)HIT-T15細(xì)胞凋亡峰，脫氧核糖核酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的原位缺口末端標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)測(cè)定凋亡細(xì)胞。 3.用高效液相色譜法檢測(cè)HIT-T15細(xì)胞的ADP、ATP及ATP/ADP的比值。 4.放免法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)48小時(shí)后及高糖(22mM)刺激1小時(shí)后上清液胰島素的濃度。 5.用RT-PCR法檢測(cè)NRF-1mRNA及PGC-1mRNA的表達(dá)。 結(jié)論: 1.GLcN誘導(dǎo)HIT-T15細(xì)胞

3、線粒體形態(tài)改變及細(xì)胞凋亡，ATP/ADP比值下降，葡萄糖刺激的胰島素分泌(GSIS)的能力下降，使PGC-1mRNA和NRF-1mRNA的表達(dá)增加，推測(cè)β功能受損可能和與線粒體呼吸鏈氧化磷酸化有關(guān)的PGC-1mRNA和NRF-1mRNA的改變存在關(guān)聯(lián)。 2.RGS可部分防止GLcN誘導(dǎo)的HIT-T15細(xì)胞線粒體形態(tài)改變及β細(xì)胞功能受損，推測(cè)可能是通過作用于PPARγ調(diào)節(jié)PGC-1mRNA和NRF-1mRNA的表達(dá)從而改善線粒體的