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文檔簡介
1、目的:As2O3是中國傳統(tǒng)中藥砒霜的主要有效成分,最早應用于血液系統(tǒng)腫瘤的治療,隨后研究表明其對實體瘤也具有抑制細胞增殖并誘導凋亡的作用。本研究小組早期研究發(fā)現(xiàn),1.0μmol/L的As2O3可以體外誘導骨肉瘤細胞系MG-63細胞凋亡,進一步的cDNAArray,RT-PCR,Northern Blot證實細胞凋亡與As2O3干預后IEX-1基因表達下調有關。本研究擬深入探討As2O3干預MG-63細胞下調IEX-1基因表達轉錄調控機制
2、。 方法:采用PCR方法從外周血gDNA中擴增出IEX-1基因的啟動子及調控序列,連入螢光素酶報告基因載體,通過雙螢光素酶分析As2O3干預對IEX-1基因啟動子轉錄活性的影響;[γ-32P]ATP末端標記EMSA分析IEX-1啟動子順式作用元件與p53結合;Western Blot檢測As2O3干預后p53及IEX-1蛋白表達水平的改變。 結果:發(fā)現(xiàn)As2O3干預骨肉瘤細胞系MG-63后能誘導p53蛋白表達上調,增加的
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