1、本文研究了太平洋牡蠣的酶解條件及其酶解產(chǎn)物對胰蛋白酶活性的抑制作用。選取胃蛋白酶、胰蛋白酶、菠蘿蛋白酶、木瓜蛋白酶、3942中性蛋白酶、Alcalase堿性蛋白酶等對牡蠣進行水解，以水解液中氨基酸態(tài)氮(AAN)的含量為指標(biāo)，確定了3種水解效果較好的酶：Alcalase堿性蛋白酶、胰蛋白酶和菠蘿蛋白酶。利用單因素試驗和正交試驗分別對這三種酶單獨水解牡蠣的條件進行了研究，得出三種酶水解牡蠣的最佳條件分別為Alcalase：溫度50℃，pH8

2、.5，料水比(W/V)1：3，加酶量1200U/g，時間4h；胰蛋白酶：溫度45℃，pH8.1，料水比1：3，加酶量1200U/g，時間4h；菠蘿蛋白酶：溫度50℃，pH5.5，料水比1：3，加酶量1400U/g，時間6h；為牡蠣生物活性肽的開發(fā)提供了基礎(chǔ)參考數(shù)據(jù)。在此基礎(chǔ)上研究了牡蠣的復(fù)合酶解條件，確定最佳的復(fù)合條件為：料水比1：3，體系最初pH為8.5，溫度50℃，加入Alcalase600U/g水解3h，然后調(diào)節(jié)pH到5.5，加入

3、菠蘿蛋白酶700U/g繼續(xù)水解3h，滅酶。另外還研究了酶解之前牡蠣肉的熱變性處理對水解效果的影響。 建立了胰蛋白酶抑制活性的測定方法，采用5K、3K和1K的超濾膜把水解液分成4個組分，測定了不同分子量范圍的超濾液的胰蛋白酶抑制活性。用分子篩層析對水解液不同組分進行了進一步分離，并測定了每個洗脫峰的活性，結(jié)果表明分子量較大的肽組分對胰蛋白酶的抑制作用比較強。選取不同的酶處理時間，研究了酶解時間長短與水解液胰蛋白酶抑制活性的關(guān)系，水

4、解時間越長水解液對胰蛋白酶的抑制活性就越低。對不同組分的水解液進行了紫外掃描并作了光譜分析，對抑制活性較高的復(fù)合水解2h組分和牡蠣直接提取液進行了進一步層析分離，結(jié)果表明第一個洗脫峰對胰蛋白酶的抑制作用最強。復(fù)合酶水解2h組分過SephadexG-25柱得到第一個峰的IC50是1.894mg/ml，直接提取液過層析柱得到第一個峰的IC50是0.658mg/ml。 對牡蠣提取物不同組分進行了氨基酸分析和SDS-PAGE電泳分析。牡