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![吳茱萸堿誘導(dǎo)人胃癌SCG-7901細胞凋亡的神經(jīng)酰胺機制.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/8d6d8fb8-fdf4-4c1d-9f1b-e6e677be8e8b/8d6d8fb8-fdf4-4c1d-9f1b-e6e677be8e8b1.gif)
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文檔簡介
1、目的:觀察吳茱萸堿是否誘導(dǎo)人胃癌SGC-7901細胞凋亡及誘導(dǎo)胃癌細胞凋亡可能的機制,為吳茱萸堿藥理作用的進一步研究提供實驗依據(jù)。
方法:體外培養(yǎng)人胃癌SGC-7901細胞,不同濃度吳茱萸堿或吳茱萸堿與胱天蛋白酶抑制劑(z-VAD-fmk)作用SGC-7901細胞12h、24h及36h:①MTT比色法觀察吳茱萸堿對胃癌細胞增殖活性的影響。②AnnexinⅤ-FITC/PI雙染細胞,利用流式細胞儀觀察藥物對SGC-7901細胞的
2、凋亡影響。③Real-time PCR檢測aSMase和nSMase基因的表達情況,采用β-actin為內(nèi)參。④HPLC檢測神經(jīng)酰胺前體物質(zhì)鞘磷脂含量變化情況。
結(jié)果:①MTT結(jié)果顯示,吳茱萸堿可抑制SGC-7901細胞增殖;AnnexinⅤ-FITC/PI雙染結(jié)果顯示,吳茱萸堿可誘導(dǎo)SGC-7901細胞凋亡,且隨劑量和時間的增加效果增強;胱天蛋白酶抑制劑能夠抑制吳茱萸堿誘導(dǎo)SGC-7901細胞的凋亡作用,但其不能完全阻止吳茱
3、萸堿誘導(dǎo)SGC-7901細胞的凋亡作用。②Real-time PCR結(jié)果顯示吳茱萸堿或吳茱萸堿與胱天蛋白酶抑制劑可使SGC-7901細胞內(nèi)的aSMase和nSMase基因表達增高,但吳茱萸堿與胱天蛋白酶抑制劑處理胃癌細胞后的基因表達較吳茱萸堿處理胃癌細胞低。③HPLC結(jié)果顯示各處理組鞘磷脂含量減少,但胱天蛋白酶抑制劑與吳茱萸堿處理組鞘磷脂含量較吳茱萸堿處理組合量高。
結(jié)論:吳茱萸堿能直接抑制人胃癌SGC-7901細胞增殖并誘導(dǎo)
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