1、鋅指蛋白是一類具有手指狀結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子，因其具有指狀結(jié)構(gòu)特征且能結(jié)合Zn2+而得名。鋅指蛋白是個(gè)龐大的家族，根據(jù)Cys和His殘基的數(shù)目和位置可將鋅指轉(zhuǎn)錄因子分為C2H2、C8、C6、C3HC4、C2HC、C2HC5、C4、CCCH和C4HC3九種類型，其中C2H2型是生物中發(fā)現(xiàn)的種類最多的一類鋅指蛋白。研究表明，植物體中的鋅指蛋白在植物生長(zhǎng)發(fā)育和耐逆性等多種生物學(xué)過程中發(fā)揮作用。本研究以白樺的鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子基因?yàn)檠芯繉?duì)象，對(duì)基因的

2、表達(dá)和功能進(jìn)行了初步研究，主要研究結(jié)論如下:
　　(1)利用qRT-PCR技術(shù)，對(duì)不同脅迫條件下14個(gè)BpZFPs基因在白樺根組織中的時(shí)序表達(dá)進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，BpZFP3、BpZFP4和Bp ZFP12均能夠?qū)Ω啕}、干旱脅迫作出應(yīng)答，并且在不同脅迫條件下基因的表達(dá)模式各不相同。
　　(2)利用PCR技術(shù)，克隆得到BpZFP3全長(zhǎng)基因，蛋白保守結(jié)構(gòu)域分析表明，BpZFP3屬于C2H2-Type鋅指蛋白。
　　(3)

3、將BpZFP3構(gòu)建到植物表達(dá)載體pGWB5質(zhì)粒中，采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法進(jìn)行擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化，獲得3個(gè)表達(dá)量顯著高于對(duì)照的轉(zhuǎn)基因株系，PCR檢測(cè)表明基因整合到擬南芥基因組中。在蔡司正直顯微鏡下對(duì)T3代幼苗的GFP熒光定位觀察發(fā)現(xiàn)，BpZFP3-GFP融合蛋白在擬南芥根部細(xì)胞中只有細(xì)胞核內(nèi)發(fā)出綠色熒光，表明BpZFP3蛋白的表達(dá)定位于細(xì)胞核中。
　　(4)對(duì)轉(zhuǎn)BpZFP3基因的擬南芥株系及非轉(zhuǎn)基因擬南芥幼苗及成苗分別進(jìn)行NaCl、Mann

4、itol和ABA脅迫處理，比較各株系的萌發(fā)率、根長(zhǎng)、鮮重、成苗的生長(zhǎng)狀態(tài)和生理指標(biāo)等，結(jié)果表明，在脅迫條件下過表達(dá)株系的萌發(fā)率、根長(zhǎng)和鮮重都優(yōu)于WT，從外部形態(tài)上看成苗的生長(zhǎng)狀態(tài)也優(yōu)于WT，其生理生化指標(biāo)(SOD、POD、MDA、脯氨酸、葉綠素)均優(yōu)于WT。以上結(jié)果表明BpZFP3基因能在不同程度上提高植物對(duì)鹽、干旱的耐受能力。
　　(5)通過PCR擴(kuò)增技術(shù)，克隆獲得長(zhǎng)度為1822bp的BpZFP3基因啟動(dòng)子，序列分析表明，該啟動(dòng)