1、目的：觀察潑尼松對(duì)阿霉素腎病(ADN)大鼠血、尿生化指標(biāo)、腎臟病理改變及腎小球足細(xì)胞nephrin和podocalyxin蛋白表達(dá)的影響，探討足細(xì)胞損傷在ADN發(fā)生發(fā)展中的作用及潑尼松對(duì)足細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。
　　方法：24只健康雄性Wistar大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)3d后，隨機(jī)分為對(duì)照組(n=8)、ADN組(n=8)及潑尼松干預(yù)組(n=8)。采用小劑量間隔1周兩次尾靜脈注射阿霉素法(劑量分別為4mg/kg及3.5mg/kg)建立大鼠A

2、DN模型。于實(shí)驗(yàn)第4周起，每日予潑尼松干預(yù)組潑尼松12.5mg/kg，配成水溶液灌胃，其余兩組同期予等劑量自來(lái)水灌胃，至實(shí)驗(yàn)結(jié)束(第8周末)。測(cè)定各組大鼠第0周、4周、8周24小時(shí)尿蛋日(24hUP)排泄量、尿肌酐(Ucr)及血生化指標(biāo)，包括血清總蛋白(Tp)、白蛋白(Alb)、膽固醇(Cho)、血肌酐(Scr)、尿素氮(Bun)，計(jì)算內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)；觀察各組大鼠第8周末光鏡下腎組織病理學(xué)改變，計(jì)算腎小球細(xì)胞外基質(zhì)面積與腎小球

3、面積之比(ECM/GA)，評(píng)估腎臟病理積分；采用免疫組化法檢測(cè)腎小球nephrin及podocalyxin蛋白的分布及表達(dá)，并運(yùn)用圖像分析軟件測(cè)定其表達(dá)的平均光密度值。應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1.對(duì)照組、ADN組及潑尼松干預(yù)組大鼠各項(xiàng)生化指標(biāo)變化
　　實(shí)驗(yàn)4周時(shí)，ADN組、潑尼松干預(yù)組24hUP、Cho、Scr升高，Tp、Alb、Ccr降低，與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示A

4、DN造模成功；實(shí)驗(yàn)8周時(shí)，ADN組24hUP、Cho、Scr持續(xù)升高，Tp、Alb、Ccr繼續(xù)降低，潑尼松干預(yù)組與ADN組比較24hUP、Cho、Scr降低，Tp、Alb、Ccr升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；潑尼松干預(yù)組第8周與其第4周比較，24hUP、Cho、Scr降低，Tp、Alb升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Ccr雖然有所升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.各組大鼠腎臟病理學(xué)改變
　　(1)光鏡下改變：對(duì)照組腎小球、腎小管結(jié)構(gòu)

5、大致正常，毛細(xì)血管開(kāi)放良好；ADN組可見(jiàn)部分腎小球囊壁增厚，并與毛細(xì)血管襻發(fā)生粘連，系膜細(xì)胞及基質(zhì)中、重度增生，腎間質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小管擴(kuò)張，管腔內(nèi)可見(jiàn)蛋白管型；潑尼松干預(yù)組較ADN組有不同程度減輕，表現(xiàn)為腎小球囊壁輕度增厚，未見(jiàn)明顯粘連，系膜細(xì)胞僅見(jiàn)輕度增生，管腔內(nèi)未見(jiàn)蛋白管型，腎間質(zhì)內(nèi)未見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　(2)腎小球ECM/GA比值及腎臟病理積分：潑尼松干預(yù)組ECM/GA比值、腎小球病理積分、腎小管病理積分、腎臟總病理

6、積分均低于ADN組(均P<0.01)。
　　3.各組腎組織nephrin及podocalyxin蛋白的分布及表達(dá)
　　Nephrin、podocalyxin在對(duì)照組腎小球均有大量棕黃色表達(dá)，沿腎小球毛細(xì)血管襻呈連續(xù)、粗線(xiàn)樣分布；在ADN組腎小球僅有少量表達(dá)，棕黃色粗線(xiàn)樣沉積逐漸變細(xì)、變淡或消失，與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.01)；潑尼松干預(yù)組與ADN組比較陽(yáng)性表達(dá)增多，恢復(fù)了粗線(xiàn)樣沉積，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<

7、0.01)；潑尼松干預(yù)組與對(duì)照組比較陽(yáng)性表達(dá)雖有減少，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。
　　4.相關(guān)性分析
　　ADN組腎小球nephrin蛋白表達(dá)與第8周末24hUP、Cho、ECM/GA、腎小球病理積分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.864、-0.861、-0.909、-0.922，均P<0.01)，與Alb、腎小球podocalyxin蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.964、0.948，均P<0.01)，與其余指標(biāo)無(wú)明顯相關(guān)性；A

8、DN組腎小球podocalyxin蛋白表達(dá)與第8周末24hUP、Cho、ECM/GA、腎小球病理積分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.801、-0.792、-0.813、-0.821，均P<0.01)，與Alb呈正相關(guān)(r=0.918，P<0.01)，與其余指標(biāo)無(wú)明顯相關(guān)性。
　　結(jié)論：
　　1.小劑量間隔1周兩次尾靜脈注射阿霉素誘導(dǎo)法可成功復(fù)制大鼠ADN模型。
　　2.足細(xì)胞損傷與ADN蛋白尿的發(fā)生發(fā)展及腎臟病理?yè)p害的進(jìn)展密切相關(guān)