1、目的：研究抗CADM-140kd抗體是否存在于臨床無肌病性皮肌炎患者中，如果存在，則對相應(yīng)的抗原進行純化和蛋白質(zhì)鑒定，并對該抗體的臨床意義進行初步分析。 方法：以K562細胞提取液作為抗原，應(yīng)用免疫印跡法檢測67例結(jié)締組織病患者和5例正常人的血清。再應(yīng)用免疫沉淀法和親和層析法對相應(yīng)的抗原進行純化，同時采用液相色譜-電噴霧離子阱質(zhì)譜(LC-ESI-IT-MS/MS)技術(shù)對抗原蛋白質(zhì)進行鑒定。最后對抗體陽性和陰性患者的臨床資料進行比

2、較，探討該抗體的臨床意義。 結(jié)果：在67例結(jié)締組織病患者和5例正常人中，有4例患者抗CADM-140kd抗體陽性，均為臨床無肌病性皮肌炎患者，其中1例患者經(jīng)系統(tǒng)應(yīng)用糖皮質(zhì)激素和免疫抑制劑治療1月后重新檢測該抗體，結(jié)果仍呈陽性?？贵w陽性組和陰性組皮肌炎患者間質(zhì)性肺病的發(fā)生率雖然沒有顯著差異(P＞0.05)，但前者要高于后者(分別為75.0％和50.0％)。用免疫沉淀法純化后的抗原進行免疫印跡檢測并沒有明顯減少非特異性條帶的出現(xiàn)。將

3、親和層析法純化的抗原進行聚丙烯酰胺凝膠電泳，未見到140kd條帶?？乖鞍踪|(zhì)經(jīng)質(zhì)譜鑒定后沒有找到相匹配的蛋白，但是從色譜圖和二級質(zhì)譜圖來看，檢測到了樣品信號，并且能頻繁抓取到肽段的二級質(zhì)譜圖。 結(jié)論：抗CADM-140kd抗體可能是C-ADM的標記抗體，具有較好的敏感性和較高的特異性，其與間質(zhì)性肺病之間的相關(guān)性尚需要通過進一步的研究來確定。免疫沉淀法和親和層析法純化細胞抗原具有一定的局限性。需要通過其他方法降低樣品的復(fù)雜程度來獲