1、目的：本實驗室在前期研究中通過溶液萃取、硅膠層析、離子交換層析、HPLC分離等技術(shù)從大蒜提取液中分離出能與內(nèi)毒素(LPS)及其活性中心LipidA特異性結(jié)合的拮抗內(nèi)毒素活性的大蒜水溶性A組分(ASLA)。ASLA與內(nèi)毒素具有較高的親合力、具有體外中和內(nèi)毒素并抑制內(nèi)毒素誘導(dǎo)的巨噬細胞釋放TNF-α、IL-6的作用，并對內(nèi)毒素攻擊動物的具有顯著的保護作用。但是，ASLA的制備和進一步分離中存在一些問題：一是ASLA產(chǎn)率不可控：無水乙醇沉淀多

2、糖過程中，目的產(chǎn)物易被溶液中析出的絮狀多糖沉淀黏附包裹，對產(chǎn)品的產(chǎn)量造成不可預(yù)計的影響，但如果剔除脫糖步驟則會使樣品在進行硅膠柱層析時因多糖析出黏附、堵塞硅膠柱而使分離無法進行；二是提取周期長，產(chǎn)量少，不便于大量制備ASLA供完成后期單體制備及藥效學與作用機制研究需要。因此，原ASLA提取方法亟待改進。 方法：利用聚酰胺柱層析、硅膠柱層析、離子交換-HPLC、生物傳感器、反相高效液相色譜(RP-HPLC)等技術(shù)，定向分離大蒜中具

3、有較高lipidA結(jié)合活性的組分。通過體內(nèi)外活性評價，確定其拮抗膿毒癥的主要有效成分。 結(jié)果：①利用水提取法、聚酰胺凝膠柱層析、硅膠柱層析、離子交換-HPLC等技術(shù)定向分離得到與lipidA有較高結(jié)合活性的組分：大蒜2號組分(DS2)。②DS2與LipidA具有較高的結(jié)合活性；對LPS攻擊小鼠具有顯著的保護效果。③經(jīng)HPLC分析制備后將DS2進一步分離為4個主要組分，其中組分B在體外具有較強的中和LPS能力，并能顯著抑制LPS刺