1、納米粒子由于其獨(dú)特的納米生物學(xué)效應(yīng)已經(jīng)引起了人們極大的研究興趣。納米技術(shù)是推動(dòng)當(dāng)今醫(yī)學(xué)發(fā)展的主要?jiǎng)恿χ?，納米粒子作為藥物載體在抗腫瘤研究方面已經(jīng)成為目前醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。 羥基磷灰石(Hydroxyapatite，HAP)納米粒子不僅具有優(yōu)良的生物相容性和抑癌活性，同時(shí)也是理想的基因和藥物載體。然而，其在抗腫瘤藥物的攜帶和治療癌癥的研究還不多見。本課題選用均相沉淀法制備的1.4 mg/mLHAP納米粒子，采用振蕩培養(yǎng)使HAP納米

2、粒子吸附阿霉素(adriamycin，ADM)，使用紫外分光光度法測(cè)試并分析其吸附量，結(jié)果顯示：HAP納米粒子對(duì)5μg/mL濃度的阿霉素吸附量最大，每克羥基磷灰石吸附阿霉素的質(zhì)量為284.2679mg。采用原子力顯微鏡觀察其形貌及吸附程度，結(jié)果顯示：HAP納米粒子吸附1～5μg/mL阿霉素的效果比較好。 將HAP納米粒子負(fù)載阿霉素(5μg/mL)與Bel-7402肝癌細(xì)胞、L-02肝細(xì)胞作用，采用光學(xué)顯微鏡觀察各組細(xì)胞的形態(tài)、數(shù)

3、目和貼壁情況，結(jié)果表明HAP納米粒子負(fù)載阿霉素后與對(duì)照組(5μg/mL阿霉素)相比，Bel-7402肝癌細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化要小，且對(duì)正常L-02肝細(xì)胞的毒性要低。采用MTT法檢測(cè)HAP納米粒子負(fù)載阿霉素對(duì)Bel-7402肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率情況和對(duì)正常L-02肝細(xì)胞的毒性影響，結(jié)果顯示：1.4mg/mL HAP納米粒子負(fù)載5μg/mL阿霉素與Bel-7402肝癌細(xì)胞作用第5天其生長(zhǎng)抑制率高達(dá)92.90±1.25％，而單獨(dú)應(yīng)用1.4mg/m

4、L，HAP納米粒子對(duì)：Bel-7402肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率為15.86±4.52％，5μg/mL阿霉素對(duì)Bel-7402肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率為81.33±1.74％，與兩藥單用相比HAP納米粒子負(fù)載5μg/mL的阿霉素的生長(zhǎng)抑制率明顯增強(qiáng)。HAP納米粒子負(fù)載5μg/mL的阿霉素與L-02肝細(xì)胞作用第3天開始，其細(xì)胞毒性明顯比單用5μg/mL阿霉素的毒性降低，細(xì)胞毒性級(jí)別由3級(jí)降到2級(jí)；作用5d細(xì)胞毒性級(jí)別由4級(jí)降到2級(jí)。 采用四環(huán)素

5、和Eu摻雜分別標(biāo)記HAP納米粒子與Bel-7402肝癌細(xì)胞作用，使用熒光顯微鏡觀察，結(jié)果表明2％Eu摻雜HAP納米粒子的熒光強(qiáng)度效果較佳。采用共聚焦激光顯微鏡動(dòng)態(tài)觀察HAP納米粒子負(fù)載阿霉素與Bel-7402肝癌細(xì)胞作用的過程及分布狀況。分析表明2％Eu標(biāo)記的HAP納米粒子主要進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，HAP納米粒子負(fù)載阿霉素主要進(jìn)入細(xì)胞核及細(xì)胞膜周圍，確定HAP納米粒子負(fù)載阿霉素使用熒光材料Eu摻雜標(biāo)記的最佳濃度為2％(g/mL)及與細(xì)胞結(jié)合的時(shí)間