人工誘導(dǎo)野生桑種質(zhì)資源染色體的加倍.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、桑樹是多年生落葉木本植物,是我國(guó)重要的生態(tài)經(jīng)濟(jì)型樹種。桑樹多倍體具有高產(chǎn),優(yōu)質(zhì),抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)。目前人工誘導(dǎo)桑樹染色體加倍的研究大多以雜交桑種子萌發(fā)的實(shí)生幼苗或栽培桑樹的器官部位為材料。例如:對(duì)四倍體桑樹誘導(dǎo)獲得的八倍體材料,進(jìn)而雜交選育桑葉優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的六倍體桑樹品種,以提高桑葉的產(chǎn)量。以野生桑資源作為材料進(jìn)行桑樹多倍體誘導(dǎo)還未見報(bào)道。而不同倍數(shù)性材料的形態(tài)學(xué)和生化成分上的差異對(duì)多倍體育種具有指導(dǎo)意義,同時(shí)為闡明植物多倍體進(jìn)化機(jī)制提供有價(jià)

2、值的信息。本研究以野生長(zhǎng)穗桑種質(zhì)資源云7(2n=7x=49)和川桑(2n=2x=14)為材料,建立不定芽誘導(dǎo)和生根體系,以二甲基亞砜為滲透劑,研究秋水仙素的處理濃度和處理時(shí)間對(duì)誘導(dǎo)多倍體植株的影響,并用組培苗的腋芽多代持續(xù)分離對(duì)得到的混倍體進(jìn)行分離篩選,得到倍性穩(wěn)定的14倍體(2n=14x=98)和4倍體(2n=4x=28)。并對(duì)移栽后的云7和14倍體誘變植株的生長(zhǎng)狀況進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)測(cè)定。
  本研究主要內(nèi)容包括:⑴以冬芽為實(shí)驗(yàn)材料

3、,對(duì)野生長(zhǎng)穗桑種質(zhì)資源云7進(jìn)行不定芽誘導(dǎo),不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基:MS+30g/L蔗糖+1.5 mg/L6-芐基氨基嘌呤+100 mg/L肌醇+8 g/L瓊脂,誘導(dǎo)獲得不定芽。將由不定芽獲得的株系接種于生根培養(yǎng)基:MS+30g/L蔗糖+0.5 mg/L萘乙酸+0.4 g/L活性炭+8 g/L瓊脂,誘導(dǎo)根系發(fā)生。獲得的云7組培苗不定芽為染色體加倍誘導(dǎo)材料,以濃度為2g/L的二甲基亞砜(DMSO)為滲透劑,使用濃度為1 g/L、2 g/L、3g/

4、L的秋水仙素浸泡云7的不定芽,浸泡時(shí)間分別為2 d、2.5 d、3 d,結(jié)果發(fā)現(xiàn)2 g/L的秋水仙素處理2.5 d后,被誘變不定芽的死亡率為53.76%,在這種接近半致死率的條件下誘導(dǎo)桑樹不定芽的染色體加倍的效果最佳。采用組培苗的腋芽多代持續(xù)分離,最終得到2株穩(wěn)定的14倍體長(zhǎng)穂桑材料。⑵云7及倍性穩(wěn)定的誘變植株(14倍體)性狀測(cè)定。云7和誘變植株組培苗生根移栽入大田3個(gè)月后,測(cè)定其形態(tài)、光合特性等指標(biāo),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明植株加倍之后,葉片差異

5、較大:葉片變大、變寬、厚,葉緣鋸齒加重,葉片顏色變深;莖粗較粗,株高變高,植株生長(zhǎng)變快;葉片氣孔細(xì)胞變大,密度變小,光合速率增加,整體長(zhǎng)勢(shì)較好。⑶以采集的川桑的種子為實(shí)驗(yàn)材料,通過(guò)胚挽救技術(shù),使其萌發(fā),取其下胚軸進(jìn)行不定芽誘導(dǎo),不定芽培養(yǎng)基為:MS+30g/L蔗糖+1.0 mg/L6-芐基氨基嘌呤+8g/L瓊脂。以獲得的川桑組培苗不定芽為材料,進(jìn)行染色體加倍誘導(dǎo),以1g/L二甲基亞砜(DMSO)為滲透劑,使用濃度為0.1 g/L、0.5

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