1、全文共分三部分.第一部分,熱休克蛋白70 (HSP70)基因轉(zhuǎn)染對人心室肌細胞的保護作用.該研究用陽離子脂質(zhì)體介導的基因轉(zhuǎn)移技術(shù),將人HSP70基因轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的人心室肌細胞 中,觀察外源性HSP70基因表達及其對人心室肌細胞抗模擬缺血損傷能力的影響,探討利用基因治療手段保護人類心肌的可行性.結(jié)論:①該實驗利用陽離子脂質(zhì)體DOTAP介導的基因轉(zhuǎn)移技術(shù),使外源性HSP70基因在體外培養(yǎng)的人心室仙細胞中獲得高水平表達;②經(jīng)外源性HSP70基

2、因轉(zhuǎn)染的心室肌細胞在無應激因子作用時即可高水平表達HSP70,其抗模擬缺血損傷的能力與經(jīng)熱休克處理的心室肌細胞無顯著差異,HSP70是熱休克反應中起主要作用的介導因子;③該課題為利用基因轉(zhuǎn)染的方法保護人心肌細胞提供了實驗依據(jù).第二部分,乙醇預處理人心室肌細胞抗過氧化氫損傷的實驗研究.該研究用乙醇預處理體外培養(yǎng)的人心室肌細胞,觀察HSP70表達及心肌細胞對過氧化氫損傷的耐受能力,并利用反義基因技術(shù),探討乙醇預處理心肌細胞抗過氧化氫損傷的機

3、理.結(jié)論:①乙醇預處理可誘導體外培養(yǎng)的人心室肌細胞發(fā)生熱休克反應,心室肌細胞中HSP70 mRNA和HSP70的表達水平上升.②心肌細胞經(jīng)乙醇預處理24小時后,其抵抗過氧化氫損傷的能力明顯提高.③利用反義基因片段阻斷乙醇預處理誘導的HSP70表達,可取消其抗過氧化氫損傷能力,證明HSP70是乙醇預處理保護作用的主要介導因子.第三部分,人心室肌細胞的體外培養(yǎng).該研究旨在建立人心室肌細胞原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)和鑒定的方法,為人類心血管疾病的研究