紅松松塔多糖膜分離制備工藝及其活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、松塔作為林業(yè)副產(chǎn)品一度曾被忽視,近年隨著對其研究的深入,人們逐漸意識到這種以往廢棄的資源卻含有重要的生理活性成分,它在免疫調(diào)節(jié)及癌癥治療等方面均顯現(xiàn)出不容小覷的值得關(guān)注的功效,多糖是其主要活性成分之一。本課題針對紅松松塔多糖的分析、制備和生物學(xué)活性等方面,進(jìn)行了探索性研究,主要創(chuàng)新點如下:
  1、建立了一種紅松松塔多糖含量測定新方法—3,5-二硝基水楊酸比色法(DNS法),文獻(xiàn)中尚未見有同類工作報道。與其它多糖含量測定方法相比,

2、該法不使用具有腐蝕性的濃硫酸,所用試劑穩(wěn)定,而且不需要對多糖進(jìn)行繁瑣的精制純化過程,即可排除單糖和其它雜質(zhì)成分的干擾。本實驗中還對該含量測定方法進(jìn)行了反應(yīng)條件研究和方法學(xué)考察。結(jié)果表明,該方法操作簡便,測定結(jié)果準(zhǔn)確,重復(fù)性好,可用于紅松松塔多糖的含量測定。
  2、首次報道了將膜分離技術(shù)用于紅松松塔多糖制備工藝的系統(tǒng)研究,采用煎煮法提取多糖,經(jīng)濃縮后,用活性炭吸附等前處理方法去除提取液中部分雜質(zhì),再對提取液進(jìn)行微濾進(jìn)一步除去雜質(zhì)、

3、此后進(jìn)行超濾分離純化。
  首先,在預(yù)處理過程中,考察了活性炭吸附法的最優(yōu)條件,實驗結(jié)果表明,活性炭吸附可使料液中雜質(zhì)含量顯著降低,從源頭著手控制膜污染的發(fā)生。其次,分別考察了微濾過程中不同壓力、濃度、溫度下膜通量的變化趨勢,結(jié)果顯示:膜通量隨壓力、溫度的升高呈上升趨勢,隨料液濃度的升高呈下降趨勢,與理論知識相吻合。在此基礎(chǔ)上進(jìn)行了正交試驗,獲得了制備紅松松塔多糖的微濾最佳工藝條件為:料液溫度40℃,料液濃度25g/L,操作壓力0

4、.10MPa。最后還采用超濾方法對微濾滲出液進(jìn)行分離純化,制得紅松松塔多糖產(chǎn)物,超濾后多糖含量由超濾前的7.20%提高到44.70%,純化效果顯著。
  3、實驗中還采用不同截留分子量的超濾膜,對微濾后的料液進(jìn)行分級分離,得到了不同分子量的多個紅松松塔多糖組分,并通過分別測定其中紅松松塔多糖的含量,得出紅松松塔多糖的分子量分布情況:分子量>10萬的占9.50%,5萬-10萬之間的占70.20%,1萬-5萬之間的占3.20%,600

5、0-1萬的占17.10%。該工作尚未見有文獻(xiàn)報道。
  4、本論文中還首次報道了紅松松塔多糖的抑菌活性。實驗結(jié)果表明,紅松松塔總多糖對大腸桿菌、青霉及釀酒酵母均有一定程度的抑制作用,其中對青霉抑制作用最強(qiáng)。對金黃色葡萄球菌沒有明顯抑制作用。紅松松塔總多糖水溶液對大腸桿菌的最小抑菌濃度均為0.5mg/mL;對青霉和釀酒酵母的最小抑菌濃度為0.25mg/mL。
  脫蛋白后的紅松松塔總多糖對供試菌的抑制作用較脫蛋白前有明顯下降。

6、不同分子量的紅松松塔多糖對供試菌抑制作用不同,由強(qiáng)到弱依次為>10萬、5萬-10萬、1萬-5萬,而分子量6000-1萬的紅松松塔多糖對供試菌無明顯的抑制作用。對于分子量>10萬和5萬-10萬之間的紅松松塔多糖而言,其對供試菌的抑制作用為青霉>釀酒酵母>大腸桿菌,即二者對真菌的抑制作用大于細(xì)菌。而分子量1萬-5萬的紅松松塔多糖對供試菌的抑制作用為大腸桿菌>青霉>釀酒酵母,即其對細(xì)菌的抑制作用大于真菌。
  除以上創(chuàng)新點之外,本實驗中

7、還對膜分離法和醇沉法制備紅松松塔多糖的工藝進(jìn)行了比較。結(jié)果顯示膜分離法制備的紅松松塔總多糖樣品多糖含量為44.70%,相比于醇沉法產(chǎn)物多糖含量23.88%有很大提高。另外通過膜分離工藝與水提醇沉工藝在生產(chǎn)成本、生產(chǎn)周期等多方面的比較,顯示出了膜分離的諸多優(yōu)勢。
  目前,熱水提取是多糖提取的主要方法,本課題還進(jìn)行了該法與超聲提取方法的比較研究。結(jié)果顯示,與熱水提取法相比,超聲提取可以得到較高的多糖得率和多糖含量,由此可知超聲提取也

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