1、研究背景:
　　Lowe綜合征又稱(chēng)眼腦腎綜合征(The oculocerebrorenal syndrome of Lowe,OCRL;OMIM＃309000)是一種以先天性白內(nèi)障、范可尼綜合征和智力低下為主要臨床特征的X連鎖隱性遺傳多系統(tǒng)受累的疾病。Lowe綜合征非常罕見(jiàn),發(fā)病率大約為1/500000。呼吸系統(tǒng)疾病、癲癇發(fā)作和猝死是最常見(jiàn)的致死原因,患者通常在20歲至40歲之間死亡。Lowe綜合征的致病基因是OCRL1基因,定位

2、在Xq26上,OCRL1含5152個(gè)核苷酸堿基對(duì),24個(gè)外顯子,編碼105kD位于高爾基體外側(cè)網(wǎng)絡(luò)的蛋白為磷脂酰肌醇4,5-二磷酸-5磷酸酶(phosphatidyli-nositol 4,5-bisphosphate 5-phosphatase,OCRL-1),OCRL-1蛋白調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)磷脂酰肌醇4,5-二磷酸(phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate,PtdIns(4,5)P2)的關(guān)鍵代謝,而Ptd

3、Ins(4,5)P2在高爾基體囊泡運(yùn)輸、細(xì)胞骨架重建和膜轉(zhuǎn)輸?shù)冗^(guò)程中起至關(guān)重要的作用。Lowe綜合征中OCRL1基因突變檢出率約為95％,迄今為止,有100多種OCRL1基因突變已見(jiàn)報(bào)道,突變類(lèi)型多種多樣。93%的OCRL1基因突變是無(wú)義、錯(cuò)義、框移或剪接位點(diǎn)突變影響OCRL1基因的第10至第18號(hào)外顯子以及第19至第23號(hào)外顯子,尤其是第15號(hào)外顯子。
　　盡管學(xué)者們對(duì)Lowe綜合征的酶學(xué)和遺傳學(xué)方面已進(jìn)行充分研究,但其致病機(jī)制

4、仍不明確,臨床無(wú)理想的治療方案。因此檢測(cè)Lowe綜合征家系中OCRL1基因突變不僅有利于Lowe綜合征臨床診斷尤其是產(chǎn)前診斷與遺傳咨詢(xún)及優(yōu)生優(yōu)育,而且有利于揭示疾病發(fā)病機(jī)制、探索新的基因針對(duì)性治療途徑。
　　目的:
　　檢測(cè)并分析中國(guó)6家系Lowe綜合征患者OCRL1基因突變,為臨床診斷提供依據(jù),為產(chǎn)前咨詢(xún)提供遺傳學(xué)指導(dǎo)。
　　方法:
　　以6例臨床診斷Lowe綜合征患兒及其7名相關(guān)家系成員為研究對(duì)象。提取研究對(duì)

5、象外周血OCRL1基因組DNA,應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)擴(kuò)增OCRL1基因全部24個(gè)外顯子及其周?chē)牟糠謨?nèi)含子,應(yīng)用正反向引物對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行直接DNA序列測(cè)定及基因突變檢測(cè)。10例尿檢正常的漢族成年人為對(duì)照人群。
　　結(jié)果:
　　1.患兒臨床特征:典型表現(xiàn)是眼睛、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和腎臟方面異常。6家系均無(wú)家族史。6例患兒為男性,全部表現(xiàn)先天性白內(nèi)障,精神運(yùn)動(dòng)發(fā)育遲緩,肌張力

6、減退,智力低下,腱反射消失,范科尼綜合征和腎小管酸中毒,其中1例合并先天性青光眼,2例合并雙眼內(nèi)斜視,3例有佝僂病表現(xiàn)、2例隱睪癥、1例頭發(fā)稀少、1例左膝外翻畸形。
　　2.基因檢測(cè)結(jié)果:在5例無(wú)血緣關(guān)系的Lowe綜合征先證者中分別發(fā)現(xiàn)1個(gè)OCRL1基因突變依次為c.1528C>T、c.2187insG、c.1366C>T、c.1499G>A和c.2581G>A,其中c.2187insG和c.1366C>T為2個(gè)新發(fā)現(xiàn)的突變,具體

7、為:
　　(1)家系1發(fā)現(xiàn)第15號(hào)外顯子上c.1528C>T為無(wú)義突變,終止密碼子提前出現(xiàn),第510位氨基酸由谷氨酰胺(glutamine,Gln,Q)變成終止密碼子,即p.Q510X,其母親、哥哥中均未檢出,該突變點(diǎn)國(guó)外已見(jiàn)報(bào)道。
　　(2)家系2發(fā)現(xiàn)第19號(hào)外顯子上c.2187insG為純合插入突變,其母親、外祖母均為雜合攜帶者,此突變尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　(3)家系3發(fā)現(xiàn)第14號(hào)外顯子上c.1366C>T為無(wú)義突變,

8、終止密碼子提前出現(xiàn),第456位氨基酸由谷氨酰胺變成終止密碼子,即p.Q456X,其母親、妹妹中均未檢出,該突變尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　(4)家系4發(fā)現(xiàn)第15號(hào)外顯子上c.1499G>A為錯(cuò)義突變,第500位氨基酸由精氨酸(arginine,Arg,R)變成谷氨酰胺,即p.R500Q,其母親拒絕行基因檢測(cè),此突變國(guó)外已見(jiàn)報(bào)道。
　　(5)家系5發(fā)現(xiàn)第22號(hào)外顯子3’末端c.2581G>A為剪接突變,該突變導(dǎo)致第22號(hào)外顯子缺失,其母

9、親未檢出,該突變國(guó)外已見(jiàn)報(bào)道。
　　(6)家系6未發(fā)現(xiàn)OCRL1基因突變,盡管其臨床特征符合Lowe綜合征。以上5個(gè)突變?cè)?0例正常對(duì)照人群中均未檢出。
　　結(jié)論:
　　1.臨床出現(xiàn)先天性白內(nèi)障、范可尼綜合征和智力低下患者,應(yīng)高度警惕Lowe綜合征?；驒z測(cè)有助于臨床確診Lowe綜合征,助于遺傳咨詢(xún)和指導(dǎo)。
　　2.我國(guó)Lowe綜合征患者存在OCRL1基因的突變,本研究檢出OCRL1基因c.1528C>T、c.2