1、研究背景：馬凡綜合征(MFS)是一種常染色體顯性遺傳的結(jié)締組織病，患病率約為1/5000～10000，主要累及眼，骨骼和心血管三大系統(tǒng)，在眼部的主要表現(xiàn)為高度近視，眼軸過長，扁平角膜以及晶體脫位：其在心血管系統(tǒng)中的主要表現(xiàn)為二尖瓣脫垂，主動脈根部擴張，而主動脈瘤和動脈夾層是馬凡綜合征患者致死的主要原因。 馬凡綜合征為一不規(guī)則顯性遺傳病，其發(fā)病主要是由于編碼原纖維蛋白1的原纖維蛋白1基因(FBN1)突變所致，在不同的家系甚至同一家

2、系的不同患者中，其發(fā)病年齡，受累器官以及臨床表型的嚴重程度都會存在明顯的不同。以往診斷馬凡綜合征主要的根據(jù)受累患者的臨床表現(xiàn)符合其臨床診斷標(biāo)準，但在許多幼年的MFS患者，其臨床表型還沒有充分顯現(xiàn)，因此，在分子水平上開展基因篩查可以早期發(fā)現(xiàn)患者，進行長期隨訪并有助于早期開展心血管并發(fā)癥的預(yù)防治療。同時，在同一家系的不同患者之間可能存在臨床表型的差異，尋找致病基因突變可以幫助確診患病個體。盡管目前對MFS基因型和表型的關(guān)系還不是清楚，對于攜

3、帶FBNl基因突變的個體還不能預(yù)測其臨床表型的嚴重程度，但是確為開展產(chǎn)前診斷提供了可能。 目的：確定中國北方常染色體顯性遺傳性馬凡綜合征(MFS)一家系的致病基因突變。 方法： 1、收集MFS一家系資料，對其進行臨床研究和系譜分析，在知情同意的前提下采集家系中3例患者和3例健康成員的靜脈血，經(jīng)典酚氯仿法提取基因組DNA。 2、應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴增馬凡綜合征致病候選基因原纖維蛋白1(FBN1)基因

4、所有外顯子及外顯子-內(nèi)含子接頭處，直接測序確定致病的基因突變。 3、將所得基因序列首先與GENEBANK進行比對，發(fā)現(xiàn)同該家系患者共分離的基因突變后，首先對該突變進行單核苷酸多態(tài)性分析(SNP)，以排除該突變是否為已知正常多態(tài)位點。其次，查詢國外相關(guān)文獻報道，以排除是否為已報道突變。最后，如果確定為新發(fā)現(xiàn)的突變，尚需對至少50個(100條染色體)無血緣關(guān)系的正常人進行該位點的PCR擴增、測序，以排除所發(fā)現(xiàn)的突變?yōu)槲粗后w多態(tài)性的

5、可能。 結(jié)果：在該家系患者FBN1基因外顯子6發(fā)現(xiàn)了錯義突變，CDNA640位的鳥嘌呤G被腺嘌呤A取代(G640A)，對應(yīng)的甘氨酸變?yōu)榻z氨酸。突變后Eag I內(nèi)切酶位點消失，該突變在家系中表現(xiàn)為與疾病共分離。G640A為再發(fā)突變，以往在一中國單純晶體脫位家系中已有報道，已證實其為致病性突變，這在典型的MFS家系中首次報道G640A的突變。而對FBN1基因其余65個外顯子的篩查并未發(fā)現(xiàn)突變。 結(jié)論：FBN1外顯子6基因突變