1、早產(chǎn)是圍產(chǎn)期新生兒死亡的首要原因，其死亡率約占5-15％。雖然經(jīng)過研究者多年的努力，早產(chǎn)的發(fā)生率至今未得到有效的控制，究其根本原因是由于人類分娩啟動的機理尚未明晰。
　　 在正常情況下，妊娠足月之前，子宮都是處于一種相對靜息的狀態(tài)，其興奮性低，不發(fā)生大的收縮。只有在臨近分娩時才發(fā)生高頻率、高強度的規(guī)律宮縮。因此，子宮由靜息態(tài)向收縮態(tài)的轉(zhuǎn)化無疑是啟動分娩的關(guān)鍵之所在。但迄今對于子宮靜息狀態(tài)終止進而轉(zhuǎn)為收縮激活的機制，尚未闡明。目前

2、的研究表明，來自母體和胎兒的諸多因子之間的相互作用而導致了子宮肌由靜息態(tài)向收縮態(tài)的轉(zhuǎn)化。
　　 妊娠期間人類胎盤合成和分泌大量的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(corticotropin-releasing hormone，CRH)在人類分娩啟動中發(fā)揮重要作用。研究發(fā)現(xiàn)，母體CRH水平與妊娠的長短有明顯的相關(guān)性，早產(chǎn)孕婦血中CRH水平在妊娠早中期就高于正常孕婦，且早產(chǎn)者CRH水平與早產(chǎn)的時間呈正相關(guān)，提示了CRH很可能是調(diào)控分娩啟動一

3、系列級聯(lián)反應的觸發(fā)因子。研究表明，CRH有著多方面的作用，如CRH可調(diào)控胎兒下丘腦-垂體-腎上腺軸的成熟；作用于胎盤調(diào)節(jié)雌激素、孕激素生成；影響胎膜前列腺素的合成和代謝；它也可直接作用于子宮肌，調(diào)節(jié)其對催產(chǎn)素的反應性[2-4]。但它究竟觸發(fā)了哪些反應最終導致分娩的啟動仍然不清楚。
　　 近年來研究證明，子宮激活分娩是一個炎癥反應過程，在妊娠末期子宮肌層以及宮頸就有大量白細胞浸潤，臨產(chǎn)子宮肌也表現(xiàn)出明顯的炎癥反應狀態(tài)，大量的白細胞

4、浸潤、組織腫脹以及一些炎性因子和標志物的表達等等?？傊置浜芸赡苁茄装Y反應，但是子宮肌的炎癥又是如何始發(fā)的目前尚不清晰。CRH是否有可能通過調(diào)節(jié)子宮肌細胞炎性因子的表達，始發(fā)于炎癥，尚無相關(guān)研究報道。
　　 因此本課題利用RT-PCR方法、放射免疫方法、Western Blot方法以及si-RNA技術(shù)檢測妊娠子宮肌細胞炎性因子mRNA和蛋白生成的變化，研究CRH對妊娠子宮肌細胞炎性因子生成的影響。
　　 主要實驗結(jié)果如

5、下：
　　 1.CRH能劑量依賴性上調(diào)未臨產(chǎn)子宮肌細胞炎性因子(IL-6、IL-8、MCP-1)mRNA和蛋白的生成。但對臨產(chǎn)子宮肌細胞中的IL-6、IL-8、MCP-1mRNA和蛋白的生成無明顯影響。
　　 2.利用siRNA技術(shù)分別干擾未臨產(chǎn)子宮肌細胞中CRHR1和CRHR2的表達。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，干擾CRHR1的表達后，CRH升高未臨產(chǎn)子宮肌炎性因子的作用消失；干擾CRHR2的表達后，CRH仍能升高未臨產(chǎn)子宮肌炎性因子的

6、作用，而且CRH的效應能被CRHR1的特異性拮抗劑Antalarmin阻斷。
　　 3.我們應用siRNA技術(shù)干擾未臨產(chǎn)子宮肌細胞中CRHR2的表達，使其僅表達CRHR1，從而觀察CRH恿過CRHR1調(diào)節(jié)炎性因子的可能信號轉(zhuǎn)導通路。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在CRHR2干擾的未臨產(chǎn)子宮肌細胞中，CRH能夠劑量依賴性的升高細胞內(nèi)cAMP水平，此效應能夠被Antalarmin阻斷，提示CRH通過與CRHR1作用升高細胞內(nèi)cAMP水平。
　　

7、而且CRH升高未臨產(chǎn)子宮肌細胞內(nèi)炎性因子水平的效應能被AC抑制劑SQ22536阻斷，而AC激動劑Forskolin則能模擬CRH升高未臨產(chǎn)子宮肌細胞內(nèi)炎性因子水平的作用，由此提AC激活的確參與CRH促進未臨產(chǎn)子宮肌細胞炎性因子生成的調(diào)節(jié)。
　　 進一步，我們將CRH和PKA抑制劑H89聯(lián)合處理細胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)H89能逆轉(zhuǎn)CRH升高未臨產(chǎn)子宮肌細胞內(nèi)炎性因子水平的效應，提示PKA參與CRH調(diào)節(jié)未臨產(chǎn)子宮肌細胞炎性因子生成的調(diào)節(jié)。這一

8、部分實驗提示CRH升高未臨產(chǎn)子宮肌細胞炎性因子的生成的細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導通路是AC-cAMP-PKA。
　　 4.我們聯(lián)合使用CRH和NF-kB的抑制劑(NFKBIZ)處理未臨產(chǎn)子宮肌細胞后，CRH升高炎性因子水平的作用消失，提示CRH可能是通過激活核轉(zhuǎn)錄因子NF-kB，進而促進炎性因子(IL-6、IL-8、MCP1)的轉(zhuǎn)錄翻譯。而我們將AC激動劑Forskolin和NF-kB的抑制劑聯(lián)合使用處理細胞后，F(xiàn)orskolin模擬CRH

9、升高未臨產(chǎn)子宮肌細胞內(nèi)炎性因子水平作用也消失，提示NF-kB參與了AC促進未臨產(chǎn)子宮肌細胞內(nèi)炎性因子水平升高的過程。
　　 與上一部分的實驗結(jié)果相結(jié)合，提示CRH確實是通過AC-cAMP-PKA信號通路進而激活NF-kB，促進炎性因子(IL-6、IL-8、MCP1)的生成。
　　 結(jié)論：
　　 本研究表明，CRH能促進未臨產(chǎn)子宮平滑肌細胞中炎性因子的生成，且主要是通過CRHR1發(fā)揮作用的。對其細胞內(nèi)信號通路的研究