1、研究目的：本課題研究：(1)環(huán)氧合酶-2(COX-2)和過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR-γ)蛋白在子宮內(nèi)膜癌中表達和臨床意義，探討COX-2選擇性抑制劑塞來昔布對于子宮內(nèi)膜癌腫瘤細胞的抑制作用及不同的調(diào)控途徑，塞來昔布聯(lián)合PPAR-γ配體羅格列酮共同應(yīng)用對于腫瘤細胞的干預效果及相關(guān)調(diào)控機制；(2)研究PTEN及其下游調(diào)控蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達，探討這些腫瘤標志物之間的相關(guān)性。
　　 實驗方法：
　　 1.采用免疫

2、組化方法，結(jié)合組織芯片技術(shù)，檢測124例Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌、28例內(nèi)膜不典型增生、35例正常內(nèi)膜中COX-2和PPAR-γ蛋白的表達水平，結(jié)合臨床病理因素進行分析。
　　 2.篩選不同COX-2基礎(chǔ)含量的子宮內(nèi)膜癌細胞株，塞來昔布分別處理COX-2高表達和低表達的Ishikawa、AN3 CA腫瘤細胞，觀察對腫瘤增殖、細胞凋亡、細胞周期的影響及相關(guān)調(diào)控蛋白的改變，檢測PGE2分泌表達水平和外源性PGE2對于塞來昔布抑瘤作用的拮抗效應(yīng)

3、。
　　 3.塞來昔布和PPAR-γ配體羅格列酮分別及聯(lián)合應(yīng)用，處理RL95-2子宮內(nèi)膜癌細胞，觀察塞來昔布和羅格列酮對于子宮內(nèi)膜癌細胞惡性生物學行為的影響和協(xié)同抑瘤作用。
　　 4.采用免疫組化方法和組織芯片技術(shù)，檢測PTEN蛋白的改變及其下游多種調(diào)控蛋白的表達情況，并分析PTEN和相關(guān)蛋白的相互關(guān)系。
　　 實驗結(jié)果：
　　 1.在Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌中，COX-2蛋白表達明顯升高，PPAR-γ蛋白表達相對

4、降低，兩者具有負性相關(guān)關(guān)系，與子宮內(nèi)膜癌的形成、發(fā)展密切相關(guān)。
　　 2.塞來昔布能夠抑制Ishikawa(COX-2高度表達)和AN3 CA(COX-2低度表達)腫瘤細胞的生長增殖，誘導細胞凋亡，阻滯細胞周期于G0/G1期，分子機制和上調(diào)cytochrome C、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、PARP、p27Kip1的表達，下調(diào)cyclinD1和cyclin E蛋白的表達有關(guān)。外源性高

5、劑量的PGE2不能完全逆轉(zhuǎn)塞來昔布的抑瘤效果，而塞來昔布可以誘導PPAR-γ蛋白的明顯上調(diào)。
　　 3.塞來昔布和羅格列酮可以有效抑制RL95-2子宮內(nèi)膜癌細胞的增殖、誘導腫瘤細胞凋亡，其分子機制與下調(diào)COX-2蛋白表達、上調(diào)PPAR-γ表達有關(guān)，也與改變凋亡調(diào)控基因Bcl-2/Bax比例、抑制survivin的表達相關(guān)。塞來昔布和羅格列酮具有抑制腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移能力的效應(yīng)，機制與逆轉(zhuǎn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)過程相關(guān)。塞來昔布和羅

6、格列酮聯(lián)合應(yīng)用抑制腫瘤的效果明顯高于單獨藥物處理組。
　　 4.PTEN的改變在正常內(nèi)膜中少見，在不典型增生內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜癌中逐漸增高，是腫瘤形成的早期分子事件。PTEN的改變促使下游多種相關(guān)蛋白異常表達，與子宮內(nèi)膜癌的進展和轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。
　　 結(jié)論：
　　 1.COX-2的高度表達和PPAR-γ的低度表達與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。塞來昔布能夠通過COX-2依賴性和非依賴性(調(diào)控PPAR-γ蛋白)途