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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分:Pax2在食管鱗癌中的表達(dá)及臨床意義
目的:研究Pax2在食管鱗癌組織、對(duì)應(yīng)癌旁組織及正常食管組織中蛋白的表達(dá),并探討其與食管鱗癌臨床病理特征的關(guān)系。
方法:運(yùn)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)104例食管鱗癌組織,53例對(duì)應(yīng)癌旁組織及14例正常食管組織中Pax2蛋白表達(dá)水平,并觀察其與食管鱗癌患者年齡、性別、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及淋巴管浸潤(rùn)的關(guān)系。
結(jié)果:食管鱗癌組織Pax2蛋白表達(dá)水平顯著高
2、于對(duì)應(yīng)癌旁組織及正常食管組織(U=36.595,P<0.0001)。并且ESCC組織中Pax2蛋白表達(dá)水平分別高于癌旁及正常食管粘膜組織(U=1261.5,P<0.0001; U=470,P=0.0283),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Pax2蛋白表達(dá)與TNM分期相關(guān)(x2=10.200,P=0.017),Pax2表達(dá)水平在37例TNMⅢ和Ⅳ期患者中明顯高于67例Ⅰ和Ⅱ期患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=1611.0,P=0.01),而與患者年齡、性別
3、、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及淋巴管浸潤(rùn)無(wú)明顯相關(guān)性。
結(jié)論: Pax2在食管鱗癌組織中的表達(dá)明顯高于對(duì)應(yīng)癌旁組織及正常食管組織,且與TNM分期有相關(guān)性。
第二部分:Pax2在食管癌中的功能研究
目的:在TE-1及ECA-109細(xì)胞株中,通過(guò)過(guò)表達(dá)或沉默Pax2基因,分析Pax2對(duì)食管癌細(xì)胞增殖、遷移能力的影響,并建立裸鼠皮下荷瘤模型,分析Pax2在裸鼠體內(nèi)對(duì)食管癌生長(zhǎng)的影響。
方法:對(duì)于轉(zhuǎn)染Pax
4、2過(guò)表達(dá)和基因沉默質(zhì)粒的TE-1及ECA-109細(xì)胞株,采用MTT實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)分別測(cè)定細(xì)胞的生長(zhǎng)率及遷移能力。各組細(xì)胞經(jīng)轉(zhuǎn)染后計(jì)算并評(píng)估Pax2對(duì)食管癌細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的影響。進(jìn)行劃痕實(shí)驗(yàn),以確定Pax2對(duì)食管癌細(xì)胞遷移能力的影響。將生長(zhǎng)4周的雌性裸鼠注射TE-1食管癌細(xì)胞株后,采用瘤內(nèi)注射法,將pcDNA3.1、pcDNA3.1-Pax2的質(zhì)粒脂質(zhì)體復(fù)合物注射至瘤體。
結(jié)果: pcDNA3.1-Pax2轉(zhuǎn)染可抑制食管癌細(xì)胞的生
5、長(zhǎng),siRNA-Pax2轉(zhuǎn)染可促進(jìn)食管癌細(xì)胞增殖。轉(zhuǎn)染pcDNA3.1和pcDNA3.1-Pax2的TE-1、ECA-109細(xì)胞,均無(wú)明顯細(xì)胞遷移。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,采用pcDNA3.1-Pax2干預(yù)的裸鼠腫瘤體積明顯大于pcDNA3.1干預(yù)的裸鼠瘤體積(P=0.012)。
結(jié)論:在體外,Pax2過(guò)表達(dá)可抑制食管癌細(xì)胞增殖,Pax2基因沉默可促進(jìn)食管癌細(xì)胞增殖。Pax2基因過(guò)表達(dá)對(duì)于食管癌細(xì)胞遷移能力無(wú)明顯影響。動(dòng)物模型上,過(guò)
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