1、目的：(1)體外實(shí)驗(yàn)研究甘肅棘豆生物堿部位對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞的抑制作用；觀(guān)察生物堿部位對(duì)HepG2細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯及誘導(dǎo)凋亡作用；檢測(cè)生物堿部位對(duì)HepG2細(xì)胞的形態(tài)、體外遷移、侵襲和粘附能力的影響。 (2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)觀(guān)察甘肅棘豆生物堿部位對(duì)KM小鼠肝癌H22細(xì)胞移植腫瘤的抑制作用及對(duì)KM小鼠免疫功能的影響；觀(guān)察甘肅棘豆生物堿部位極高劑量口服毒性。 方法：(1)體外實(shí)驗(yàn)用MTT法檢測(cè)甘肅棘豆生物堿部位對(duì)人肝癌HepG

2、2細(xì)胞的抑制率及HepG2細(xì)胞與Ⅳ型膠原粘附能力的影響；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)生物堿部位對(duì)HepG2細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡及細(xì)胞周期阻滯作用；用倒置相差顯微鏡觀(guān)察生物堿部位對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)及其形態(tài)的影響；Boyden小室檢測(cè)生物堿部位對(duì)HepG2細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響。 (2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用鼠源性肝癌細(xì)胞H22移植瘤法，將60只KM小鼠隨機(jī)分為五組，其中三組分別給予甘肅棘豆生物堿部位32、16、8 mg/㎏體重，兩個(gè)對(duì)照組分別給予生理鹽水(N

3、S)20ml/㎏體重和5-FU15mg/㎏體重。檢測(cè)平均瘤重和抑瘤率，計(jì)算脾指數(shù)(SI)、胸腺指數(shù)(TI)，MTT法測(cè)脾細(xì)胞增殖率。極高劑量口服毒性實(shí)驗(yàn)將生物堿部位按最大容積給予3000mg/㎏體重，觀(guān)察小鼠毒性反應(yīng)。 結(jié)果：(1)甘肅棘豆生物堿部位能抑制人肝癌HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)，且呈時(shí)間、劑量依賴(lài)性，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 (2)流式細(xì)胞檢測(cè)顯示甘肅棘豆生物堿部位能誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞的周期阻滯，呈

4、劑量依賴(lài)性；小劑量能誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡。 (3)Boyden小室體外遷移、侵襲能力檢測(cè)結(jié)果顯示甘肅棘豆生物堿部位對(duì)HepG2細(xì)胞的遷移、侵襲能力有抑制作用，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 (4)粘附實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示甘肅棘豆生物堿部位對(duì)HepG2細(xì)胞與Ⅳ型膠原的粘附能力有抑制作用，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 (5)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)甘肅棘豆生物堿部位在濃度為32、16、8 mg/㎏體重時(shí)，對(duì)肝癌細(xì)

5、胞H22實(shí)體移植瘤的抑制率分別為：43％，29％，23％，且其平均瘤重與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 (6)甘肅棘豆生物堿部位各劑量組小鼠的脾指數(shù)和胸腺指數(shù)均顯著高于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 (7)甘肅棘豆生物堿部位各組在24h，48h，72h的脾細(xì)胞增殖率明顯高于對(duì)照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 (8)極高劑量口服毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，甘肅棘豆生物堿部位對(duì)KM小鼠體重和

6、各主要臟器質(zhì)量均無(wú)明顯影響，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論：(1)甘肅棘豆生物堿部位能在體外顯著抑制人肝癌HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)，且呈時(shí)間、劑量依賴(lài)性。 (2)甘肅棘豆生物堿部位能誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞的細(xì)胞周期阻滯，呈劑量依賴(lài)性；且在小劑量時(shí)能誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡，提示了其可能的抗腫瘤機(jī)制。 (3)甘肅棘豆生物堿部位能抑制HepG2細(xì)胞的體外遷移、侵襲及與Ⅳ型膠原的粘附能力，提示生物堿部位通過(guò)改變Hep