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文檔簡介
1、梨黑星病(VenturianashicolaTanaketYamamota)是世界性的梨樹重要病害之一,已遍及世界上所有梨產(chǎn)區(qū)。近幾年來,隨著我國梨樹生產(chǎn)的發(fā)展,梨黑星病不斷蔓延,危害逐年加重,成為影響我國梨生產(chǎn)的主要限制因子,因此選育抗病品種是控制病害最經(jīng)濟、最有效和最安全的方法之一。DNA分子標記是隨著分子生物學技術(shù)的發(fā)展出現(xiàn)的一類重要的遺傳標記,近年來發(fā)展非常迅速,已在果樹遺傳育種研究的各個方面得到廣泛的應(yīng)用,但對梨黑星病分子生物
2、學方面的研究尚未見報道。 本研究利用抗病品種新蘋梨為母本,感病品種雪花梨為父本配制的雜交組合,對其雜交后代進行了田間自然感病和棚內(nèi)接種梨黑星病病菌后的抗性調(diào)查,并進行了AFLP分子標記的研究,建立了用于梨AFLP的分子標記體系,基本找到了與梨黑星病抗性基因相關(guān)的分子標記,為最終掌握梨黑星病抗性遺傳規(guī)律,梨黑星病抗性育種早期選擇提供了理論依據(jù)。 試驗建立了適合梨AFLP分析的技術(shù)體系,以改良CTAB法提取基因組DNA,去除
3、RNA后經(jīng)雙酶切、接頭連接,將連接產(chǎn)物稀釋10倍用引物組合ECORI+0/MseI+C進行預擴增,預擴增產(chǎn)物稀釋20倍后用引物組合ECORI+3/MseI+3所組成的64對引物進行選擇性擴增,擴增條帶清晰、多態(tài)性高,適合梨基因組分析。 采用群體分離分析法(BSA法,BulkedSegregantAnalysis),對由抗病后代和感病后代組成的抗病和感病兩個混合基因庫進行分析,對64對引物組合進行篩選,結(jié)果表明引物組合ECORI+
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