1、本試驗(yàn)以源自內(nèi)蒙古呼和浩特嬰兒及乳牛糞便，并已經(jīng)過(guò)商品抗生素耐性試驗(yàn)后選出的10株菌為試材，進(jìn)行合成維生素B6能力的篩選試驗(yàn)。其中4株菌B25、B72、B76和N59-1合成維生素B6的能力較高。同時(shí)對(duì)合成維生素B6能力較高的4株菌株進(jìn)行耐酸性、耐膽鹽試驗(yàn)。結(jié)果表明，4株菌對(duì)酸和膽鹽的耐受能力有所不同，其中N59-1對(duì)酸和膽鹽的耐受性較其它3株菌較高。而且在人工胃液和腸液的耐受性試驗(yàn)中，N59-1在pH值3的人工胃液保持3h，存活率為8

2、9.33％，再?gòu)奈敢恨D(zhuǎn)移到腸液保持3h后，N59-1的存活率仍大于80％，其它三株菌的存活率低于80％。直到24h后，N59-1仍有一定的活菌數(shù)，存活率為77.20％，活菌對(duì)數(shù)值為7.45。 在傳統(tǒng)的生化鑒定的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步利用分子生物學(xué)方法對(duì)菌株N59-1進(jìn)行了16S rDNA基因的擴(kuò)增與測(cè)序，并將結(jié)果與乳桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的16S rRNA/DNA基因序列作同源性分析，建立系統(tǒng)發(fā)育樹。結(jié)果表明，菌株N59-1與標(biāo)準(zhǔn)菌株L.plan

3、tarum JCM1149的同源性為99.7％，結(jié)合系統(tǒng)發(fā)育樹分析及16S rDNA部分序列分析，可將菌株N59-1判定為L(zhǎng).plantarum，這與生理生化等傳統(tǒng)分類鑒定方法所得結(jié)果基本一致。 對(duì)鑒定為植物乳桿菌的N59-1進(jìn)行灌胃小白鼠的致病性試驗(yàn)，結(jié)果表明試驗(yàn)菌株N59-1對(duì)小鼠無(wú)致病性，是安全的。同時(shí)通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化植物乳桿菌N59-1的增菌培養(yǎng)基，結(jié)果表明，用優(yōu)化的MRS增菌培養(yǎng)基培養(yǎng)植物乳桿菌，培養(yǎng)終止時(shí)間為8h，活